[發明專利]一種參與紫草素生物合成的CYP76B74蛋白及其編碼基因與應用

有效

• 申請號: 201810148877.3
• 申請日: 2018-02-13
• 公開（公告）號: CN108060143B
• 公開（公告）日: 2020-04-28
• 發明（設計）人: 黃璐琦;王升;郭蘭萍;王瑞杉;劉談
• 申請（專利權）人: 中國中醫科學院中藥研究所
• 主分類號: C12N9/02
• 分類號: C12N9/02;C12N15/53;C12P7/66
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

1.一種蛋白質，其特征在于：所述蛋白質的氨基酸序列如序列表中序列1所示。

2.編碼權利要求1所述蛋白質的核酸分子。

3.如權利要求2所述的核酸分子，其特征在于：編碼所述蛋白質的核酸分子為如下A1）或A2）所示的DNA分子：

A1）編碼區是序列表中序列2所示的DNA分子；

A2）核苷酸序列是序列表中序列2所示的DNA分子。

4.含有權利要求2或3所述核酸分子的表達盒、重組載體、重組微生物。

5.權利要求1所述蛋白質，或權利要求2或3所述核酸分子，或含有權利要求2或3所述核酸分子的表達盒、重組載體、重組微生物的應用，為如下c1）至c9）中至少一種：

c1）制備具有對苯二酚2-香葉醌-3’’羥化酶的功能的產品；

c2）催化對苯二酚2-香葉醌；

c3）制備用于催化對苯二酚2-香葉醌的產品；

c4）將對苯二酚2-香葉醌催化成3’’羥基-對苯二酚2-香葉醌；

c5）制備用于將對苯二酚2-香葉醌催化成3’’羥基-對苯二酚2-香葉醌的產品；

c6）生產3’’羥基-對苯二酚2-香葉醌；

c7）制備用于生產3’’羥基-對苯二酚2-香葉醌的產品；

c8）生產紫草素類化合物；

c9）制備用于生產紫草素類化合物的產品。

6.如權利要求5所述的應用，其特征在于：所述c7）或c8）中，所述生產3’’羥基-對苯二酚2-香葉醌以對苯二酚2-香葉醌作為底物。

7.一種重組菌，是將權利要求2或3所述核酸分子導入宿主菌中得到的；所述宿主菌為酵母。

8.一種對苯二酚2-香葉醌-3’’羥化酶的制備方法，包括如下步驟：培養權利要求7所述重組菌，從培養菌液中得到對苯二酚2-香葉醌-3’’羥化酶。

9.3’’羥基-對苯二酚2-香葉醌的制備方法，包括如下步驟：

e1）培養權利要求7所述重組菌，從培養菌液中得到對苯二酚2-香葉醌-3’’羥化酶；

e2）用對苯二酚2-香葉醌-3’’羥化酶催化對苯二酚2-香葉醌，從催化產物中分離得到3’’羥基-對苯二酚2-香葉醌。

10.試劑盒甲或試劑盒乙；

所述試劑盒甲包括權利要求7所述重組菌；

所述試劑盒乙包括權利要求7所述重組菌和對苯二酚2-香葉醌；

所述試劑盒甲或試劑盒乙的用途為生產3’’羥基-對苯二酚2-香葉醌或紫草素類化合物。