[發明專利]融合蛋白HFBI-RGD作為疏水性材料分散劑的用途

有效

• 申請號: 201810148676.3
• 申請日: 2018-02-13
• 公開（公告）號: CN108440670B
• 公開（公告）日: 2021-04-27
• 發明（設計）人: 王澤方;肖云杰;王斌;楊海濤
• 申請（專利權）人: 天津大學
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C07F5/02;C09K11/06
• 代理公司: 天津市北洋有限責任專利代理事務所 12201
• 代理人: 陸藝

本發明公開了融合蛋白HFBI?RGD作為疏水性材料分散劑的用途，所述融合蛋白HFBI?RGD的氨基酸序列是SEQ ID NO.2所示。本發明的融合蛋白HFBI?RGD具有溶解性好的特點。本發明的HFBI?RGD融合蛋白既具有HFBI的結構和功能，又具有細胞黏附活性，這種融合蛋白能夠定位到含整合素的腫瘤部位而具有較好的靶向性。HFBI?RGD融合蛋白仍然可以作為乳化劑使小油滴在水中穩定存在，可以作為分散劑分散石墨烯、碳納米管以及疏水性熒光探針，解決疏水性材料分散問題，并且由于該融合蛋白包含短肽RGD，這又賦予該融合蛋白整合素靶向性，可用于腫瘤診斷、藥物傳輸等領域。

技術領域

本發明屬于蛋白的基因工程領域，具體地涉及一種融合蛋白HFBI-RGD的用途。

背景技術

真菌疏水蛋白(hydrophobins)是由絲狀真菌分泌產生的含有豐富的疏水氨基酸的分子量大約為10kDa的兩性蛋白，具有特殊的物理和化學性質，在菌絲與空氣的接觸中起到重要作用。真菌疏水蛋白具有疏水和親水兩部分，通過自組裝可以使得在界面處形成約10nm的兩性蛋白膜，這些膜可以使親水和疏水表面發生逆轉，使得親水性的物質具有疏水性，疏水性物質具有親水性。根據疏水蛋白形成的蛋白膜的溶解性，真菌疏水蛋白分為I型和II型。其中，II型疏水蛋白包含HFBI。真菌疏水蛋白HFBI被認為是已知的表面活性最高的蛋白之一。近些年真菌疏水蛋白在國際上得到了廣泛的應用，在不同領域有許多不同的理論價值和應用價值，如個人護理產品和乳液，分離技術，生物傳感器和電極，生物材料等等。

癌癥已經成為威脅人類生命的重大病癥之一，因此研究診斷和治療癌癥的方法已成為許多科研工作者的研究焦點。為了能更好的探測腫瘤，為了提高藥物的利用率，腫瘤靶向性的研究成為主要的研究方向。RGD是含有精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(Arg-GlyAsp)的三肽序列。整合素是一個異源二聚體組成的膜受體蛋白家族，能特異性識別RGD。RGD肽廣泛存在于生物體內，具有分子質量小、剪切力分散和有機溶劑影響較小的優點。整合素由α和β亞基組成，位于細胞表面。迄今為止已發現有18種不同的α亞基和8種不同的β亞基組成的24種異源二聚體。其中α_vβ₃研究較為廣泛，主要在腫瘤血管生成和腫瘤細胞轉移中起作用。RGD是整合素與其配體蛋白相互作用的識別位點，介導細胞與胞外基質及細胞間的黏附作用，同時具有信號傳導功能，從而介導許多重要的生命活動。RGD與腫瘤細胞表面的整合素α_Vβ₃有強的親和性，被用于給腫瘤細胞傳送藥物，基因的靶向載體等。

目前，尚未有將一種真菌疏水蛋白HFBI和RGD序列制備成融合蛋白及其應用的報道。盡管對于疏水蛋白而言具有許多重要的理論和應用價值，但要將其應用于分子診斷，藥物傳輸及靶向載體等方面仍存在不足。

發明內容

本發明的目的是克服現有技術的不足，提供一種融合蛋白HFBI-RGD作為疏水性材料分散劑的用途。

本發明的技術方案概述如下：

融合蛋白HFBI-RGD作為疏水性材料分散劑的用途。

融合蛋白HFBI-RGD的氨基酸序列是SEQ ID NO.2所示。

本發明的優點：

本發明融合蛋白HFBI-RGD具有溶解性好的特點。實驗表明，本發明的HFBI-RGD融合蛋白既具有HFBI的結構和功能，又具有細胞黏附活性，這種融合蛋白能夠定位到含整合素的腫瘤部位而具有較好的靶向性。HFBI-RGD融合蛋白可以作為乳化劑使小油滴在水中穩定存在，可以作為分散劑分散石墨烯、碳納米管以及疏水性熒光探針，解決疏水性材料分散問題，并且由于該融合蛋白包含短肽RGD，這又賦予該融合蛋白整合素靶向性，可用于腫瘤診斷、藥物傳輸等領域。

附圖說明

圖1為BCA蛋白總量分析篩選陽性克隆。

圖2為HFBI-RGD蛋白高效液相色譜層析檢測圖。