[發明專利]一種靈芝多糖用于制備中藥免疫增強劑的用途

有效

• 申請號: 201810145067.2
• 申請日: 2018-02-12
• 公開（公告）號: CN108567793B
• 公開（公告）日: 2020-06-26
• 發明（設計）人: 張萍;江善祥;李艷艷;徐孝宙;劉海俠;戴鼎震;蔣加進;楊海峰
• 申請（專利權）人: 南京農業大學;江蘇南京農大動物藥業有限公司
• 主分類號: A61K31/715
• 分類號: A61K31/715;A61K39/17;A61P37/04;A61P31/14
• 代理公司: 江蘇圣典律師事務所 32237
• 代理人: 龔擁軍

本發明提供一種靈芝多糖中藥免疫增強劑的制備與使用方法，僅用赤靈芝子實體材料提取其中的多糖制備成中藥免疫增強劑，并取14日齡非免疫雛雞使用新城疫Ⅳ滴鼻、點眼首次免疫，28日齡時進行二次免疫，每次免疫的同時給雛雞經口灌服靈芝多糖溶液，給藥劑量為12.5?50mg/kg體重，每日1次，連續給藥3天。在首免后的第7天、第14天、第21天和第28天進行測定，發現靈芝多糖可明顯促進雞外周血和脾臟淋巴細胞增值，提升ND?HI抗體水平，提高免疫器官指數，提高血清中IL?4、IL?6、IFN?g等細胞因子濃度，提高十二指腸SIgA含量，從而提高機體的免疫能力，增強疫苗的免疫效果。

技術領域

本發明屬于免疫增強劑領域，尤其涉及一種禽畜使用的中藥免疫增強劑。

背景技術

畜禽傳染性疾病尤其是病毒性疾病，是危害畜牧業發展的首要問題，也給畜禽養殖業帶來巨大損失。因病毒具有獨特的生物特征和發病機理，目前還沒有針對病毒性疾病有效的治療方法，所以疫苗接種則成了主要的預防措施。但臨床因各種原因，免疫失敗現象經常出現。為提高機體對抗原或微生物特異性反應，使機體獲得更好的免疫保護作用，免疫增強劑應運而生。免疫增強劑是通過一定途徑來提高機體對抗原或微生物特異性反應的一類物質，也稱免疫佐劑。目前國內外廣泛使用的化學性免疫增強劑有Al(OH)3、AlPO4等，但他們具有一定的殘留，且對機體組織有一定的刺激、損傷、致癌作用。其后蜂膠佐劑、乳酸桿菌DNA免疫佐劑和脂質體佐劑被廣泛研究，但以上三種佐劑成本較高，效果不太穩定，限制了其在臨床廣泛的應用。因此尋找高效、安全、無耐藥性，在畜產品中無殘留，但又能提高疫苗的免疫保護率的免疫增強劑，成為當前畜禽生產中迫切需要解決的問題。

在專利號為CN201310365016.8的專利中，提供的一種提高肉雞免疫力的中草藥制劑，這種藥劑主要用于添加在禽畜日常飼料中，且是全程添加。除該專利外，另外也已公開了多項中藥免疫增強劑的技術方案，但是這類技免疫增強劑在使用過程中，都是全程添加于禽畜飼料中，這便要求每日喂養前都需要在飼料中加入中藥增強劑并且混合攪拌，以達到充分混合的目的，使用時及其不便。雖然每天增加的量少，但是養殖全程喂養所需的中藥劑量還是很大，并且量越小其混合難度越大，存在嚴重不足。

發明內容

為解決以上問題，本發明提供一種靈芝多糖用于制備中藥免疫增強劑的用途，其步驟如下：

（1）取赤靈芝子實體根莖洗凈、切塊，置于105℃烘箱滅酶5 min；滅酶結束后置于55℃烘箱干燥，粉碎，過40目篩；

（2）加入5倍體積分數95%乙醇水浴加熱，除去小分子單糖和脂肪，過濾，濾渣至陰涼通風處晾干，并于4℃下密封放置備用；

（3）取經預處理后靈芝干燥粉末10g，然后將藥材粉末置于100mL圓底燒瓶中按料液比1:20加入蒸餾水，恒溫水浴100℃中提取1 h，過濾，重復操作3次；

（4）合并提取液，濃縮至150mL，再緩緩加入3倍體積即450mL的95%乙醇混合，邊加邊攪拌，靜置12 h；

（5）將步驟（4）中靜置12h后的提取液在3000r/min的離心機下離心15min，隨后用蒸餾水透析3d；

（6）收集所得成分置于水浴鍋上80℃將乙醇徹底揮盡，得膏狀物；

（7）將膏狀物冷凍干燥至恒重，即得粗制靈芝多糖中藥免疫增強劑，使用硫酸苯酚法測定粗制靈芝多糖中藥免疫增強劑中的靈芝多糖含量；

（8）取1日齡非免疫雛雞，飼養至14日齡時用新城疫Ⅳ滴鼻和點眼進行首次免疫，首次免疫的同時，給雛雞經口灌服靈芝多糖中藥免疫增強劑，連續給藥3天，每次給藥劑量以靈芝多糖中藥免疫增強劑中所含的靈芝多糖計則其給藥計量為12.5-50mg/kg體重，即1kg重的雛雞灌服包含12.5mg-50mg靈芝多糖的中藥免疫增強劑；