[發明專利]艾滋病治療藥物NRTIs耐藥突變位點G73S的引物及其應用在審
| 申請號： | 201810144207.4 | 申請日： | 2018-02-11 |
| 公開（公告）號： | CN108220482A | 公開（公告）日： | 2018-06-29 |
| 發明（設計）人： | 梁冰玉;臧寧;黃頡剛;余軍;蔣俊俊;陳榮風;楊全略;寧傳藝;廖艷研;梁浩;葉力 | 申請（專利權）人： | 廣西醫科大學 |
| 主分類號： | C12Q1/70 | 分類號： | C12Q1/70;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 廣西南寧公平知識產權代理有限公司 45104 | 代理人： | 楊立華 |
| 地址： | 530021 廣西壯*** | 國省代碼： | 廣西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 引物 耐藥突變位點 檢測 核苷類逆轉錄酶抑制劑 艾滋病 堿基突變序列 艾滋病治療 基因型檢測 特異性擴增 基因類型 擴增曲線 實驗周期 特異性強 特異序列 突變模板 下游序列 有效檢測 病毒RNA 低豐度 可檢測 靈敏度 試劑盒 氨基酸 豐度 堿基 位點 突變 應用 上游 | ||
1.艾滋病治療藥物NRTIs耐藥突變位點G73S的引物，其特征在于為引物對一、引物對二、引物對三、引物對四或引物對五，每個引物對均由上游特異序列和下游序列組成；所述引物對一的上游特異序列和下游序列分別具有序列表SEQ.ID.NO.1和SEQ.ID.NO.2的堿基序列；所述引物對二的上游特異序列和下游序列分別具有序列表SEQ.ID.NO.3和SEQ.ID.NO.4的堿基序列；所述引物對三的上游特異序列和下游序列分別具有序列表SEQ.ID.NO.5和SEQ.ID.NO.6的堿基序列；所述引物對四的上游特異序列和下游序列分別具有序列表SEQ.ID.NO.7和SEQ.ID.NO.8的堿基序列；所述引物對五的上游特異序列和下游序列分別具有序列表SEQ.ID.NO.9和SEQ.ID.NO.10的堿基序列。
2.權利要求1所述引物在檢測艾滋病治療藥物核苷類逆轉錄酶抑制劑耐藥突變位點G73S中的應用。
3.艾滋病治療藥物核苷類逆轉錄酶抑制劑耐藥突變位點G73S的ASPCR檢測方法，其特征在于采用權利要求1所述引物，針對G73S位點突變以待檢測樣品的cDNA為模板進行PCR擴增。
4.根據權利要求3所述的ASPCR檢測方法，其特征在于：所述PCR反應體系共25μL，其中2X SYBR Green PCR Master Mix 12.5μL，突變位點的上下游引物各1.0μL，待檢樣品cDNA模板2μL，ddH208.0μL，ROX 0.5μL；所述PCR反應程序為：①預變性95℃1min，②然后95℃10sec，退火60℃60min，延伸72℃1min，重復40個循環。
5.檢測艾滋病治療藥物核苷類逆轉錄酶抑制劑耐藥突變位點G73S的試劑盒，其特征在于包括權利要求1所述引物。
6.根據權利要求5所述的試劑盒，其特征在于包括權利要求1所述引物、2X SYBR GreenPCR Master Mix、ddH2O和ROX。
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