[發明專利]豬紅細胞ECR1-like膜結合肽段、多克隆抗體、制備方法及應用有效
| 申請號: | 201810142380.0 | 申請日: | 2018-02-11 |
| 公開(公告)號: | CN108359007B | 公開(公告)日: | 2021-11-23 |
| 發明(設計)人: | 尹偉;李宏全;范闊海;孫娜;孫耀貴 | 申請(專利權)人: | 山西農業大學 |
| 主分類號: | C07K14/705 | 分類號: | C07K14/705;C07K16/28 |
| 代理公司: | 西安銘澤知識產權代理事務所(普通合伙) 61223 | 代理人: | 韓曉娟 |
| 地址: | 030801 山*** | 國省代碼: | 山西;14 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 紅細胞 ecr1 like 結合 克隆 抗體 制備 方法 應用 | ||
1.一種豬紅細胞ECR1-like膜結合肽段,其特征在于,所述豬紅細胞ECR1-like膜結合肽段的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,為ISANTVILFWFTCLFVQLY。
2.一種由權利要求1所述的豬紅細胞ECR1-like膜結合肽段作為抗原制成的多克隆抗體。
3.根據權利要求2所述的多克隆抗體的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:
S1,制備抗原
人工合成SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列,作為抗原;
S2,制備多克隆抗體
S21,制備多克隆抗血清:
取2mL弗氏完全佐劑和2mL的溶于PBS的抗原,使之乳化,得到抗原乳化液,給家兔注射0.5mL抗原乳化液;兩周后,用混溶于弗氏不完全佐劑中的抗原乳化液對家兔進行加強免疫;10d后,家兔心臟采血,收集兔血清,即為多克隆抗血清;
S22,收獲多克隆抗血清中的多克隆抗體;
S23,抗體一級純化:用葡聚糖凝膠A-50對多克隆抗體進行純化,得到一級純化抗體;
S24,抗體二級純化:用對蛋白純化儀器對一級純化抗體進行純化,得到二級純化抗體,即豬紅細胞ECR1-like膜結合肽段多克隆抗體。
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