[發明專利]睡蓮人工雜交育種方法

有效

• 申請號: 201810140923.5
• 申請日: 2018-02-11
• 公開（公告）號: CN108243946B
• 公開（公告）日: 2020-02-21
• 發明（設計）人: 郝青;劉慶超;徐麗慧;劉慶華;王奎玲
• 申請（專利權）人: 青島農業大學
• 主分類號: A01H1/02
• 分類號: A01H1/02
• 代理公司: 北京漢智嘉成知識產權代理有限公司 11682
• 代理人: 蔣宇星;高芬芳

1.睡蓮人工雜交育種方法，包括如下步驟：

(1)花粉采集：在大蕾期采集父本的花藥，將所述花藥干燥至花藥開裂散粉，收集花粉；

(2)柱頭黏液的采集：在花蕾期，對母本的花朵進行套袋，待母本的花朵開放第1天取母本柱頭黏液；

(3)花粉在柱頭黏液中的萌發：將上述步驟(1)收集的花粉散落在步驟(2)的母本柱頭黏液中，置于25℃～30℃培養箱中進行暗培養，2h～4h后在顯微鏡下觀察拍照，統計花粉萌發率，以花粉管伸出超過花粉粒直徑時為萌發標準；

(4)雜交親本選擇：篩選步驟(3)中萌發率≥20％且花粉管伸長正常的組合作為雜交授粉的親本組合；

(5)人工授粉：對所述步驟(3)篩選出的親本組合進行人工授粉，授粉后的母本入水發育，等待果實成熟，收集雜交種子；所述人工授粉的方法為：在所述親本花朵開放之前，挑選發育時期一致的花蕾，用硫酸紙袋套袋，至母本花朵開放第1天，柱頭分泌粘液時，采集套袋父本的花粉放入母本的柱頭黏液中進行人工授粉。

2.根據權利要求1所述的睡蓮人工雜交育種方法，其特征在于：所述步驟(1)中所述采集的時間為開花前兩天的早上8時～10時。

3.根據權利要求1或2所述的睡蓮人工雜交育種方法，其特征在于：所述干燥為自然風干。

4.根據權利要求1所述的睡蓮人工雜交育種方法，其特征在于：所述收集雜交種子包括如下步驟：將裝有成熟果實的網袋收起，內部的硫酸紙袋起到防蟲的作用；將硫酸紙中的種子輕輕沾水使其灑落水中，以避免其他雜質一起落入盆中影響種子清洗；用紗布輕輕揉搓種子，去除種子外的膜囊，播種，或將種子保存于盛有蒸餾水的5ml離心管中，置于0℃～4℃冰箱中保存，每隔2周～3周更換一次水。

5.根據權利要求1所述的睡蓮人工雜交育種方法，其特征在于：所述步驟(2)中所述母本柱頭黏液是用2ml～5ml的針管吸取，放入離心管中，并置于冰盒中帶回實驗室，用于花粉萌發實驗。

6.根據權利要求1所述的睡蓮人工雜交育種方法，其特征在于：所述步驟(3)中還包括如下步驟：將步驟(2)的母本柱頭黏液滴于凹槽載玻片上，每個品種的柱頭黏液各滴3～4個凹槽，用解剖針將所述步驟(1)采集的花粉均勻的散落在黏液中，蓋上蓋玻片，放在鋪有濕潤濾紙的培養皿中，置于25℃～30℃培養箱中進行暗培養，2h～4h后在顯微鏡下觀察拍照，每個凹槽觀察不少于6個視野，統計花粉萌發率，以花粉管伸出超過花粉粒直徑時為萌發標準。

7.權利要求1-6中任一所述的睡蓮人工雜交育種方法在睡蓮雜交育種中的應用。