[發明專利]一種煙葉中硒元素的含量測定方法

有效

• 申請號: 201810136990.X
• 申請日: 2018-02-09
• 公開（公告）號: CN108152426B
• 公開（公告）日: 2021-09-24
• 發明（設計）人: 黃樂珊;陳澤鵬
• 申請（專利權）人: 中國煙草總公司廣東省公司;廣州醫科大學附屬第三醫院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 佛山幫專知識產權代理事務所(普通合伙) 44387
• 代理人: 顏春艷

本發明屬于煙草測試技術領域，具體公開了一種煙葉中硒元素的含量測定方法。其包括將煙葉打碎，使用纖維素酶以及NaOH的混合溶液100ml浸泡45?60min，靜置3h，取液體注入高效液相色譜儀，于以下條件進行分離，并通過待測液和標準液之間色譜峰的比值換算，計算得到實際的Se元素含量。本發明通過使用纖維素酶以及NaOH溶液的處理，分解細胞壁并且將Cu、Cr等離子多數消除，排除這些離子對Se元素測試的干擾，并且，在合適的測試條件參數下，Se的測試結果極為精確。

技術領域

本發明涉及煙草測試技術領域，具體涉及一種煙葉中硒元素的含量測定方法。

背景技術

硒(Se)是生命必需的微量元素，是人體谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)重要活性成分，起到清除體內自由基的作用；缺硒與人體40多種疾病有關(如惡性腫瘤、乙型肝炎、心血管病和糖尿病等等)，硒在人體內能保護蛋白質和DNA大分子結構以及功能免受自由基的損傷，起到降低基因突變性、修復DNA的作用，人體內硒的攝入量與癌癥的發病率成負相關；同時硒能降低煙堿和焦油的毒性，對腫瘤起抑制，對煙氣中多種致癌物質具有拮抗作用。因此如何提高煙草中的硒含量是困擾目前的煙草行業的重要命題。

基于此，對于硒元素的檢測技術也至關重要，由于煙葉中微量元素較多，在進行檢測時，這些微量元素之間在測試時會互相干擾，造成檢測結果不準確。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是，為了克服現有技術中存在的上述不足，提供一種煙葉中硒元素的含量測定方法，其通過選擇合適的測試條件，同時通過處理，排出煙葉中Cu、Cr、Mn和Fe等元素的干擾，使硒元素的測試結果更加精確。

本發明所要解決的上述技術問題通過以下技術方案予以實現：

一種煙葉中硒元素的含量測定方法，包括以下步驟：將煙葉打碎，使用纖維素酶以及NaOH的混合溶液100ml浸泡45-60min，靜置3h，取液體注入高效液相色譜儀，于以下條件進行分離：

色譜條件：色譜柱為十八烷基硅烷鍵合硅膠；流動相包括流動相A和流動相B，其中，所述流動相A為體積比為(10:90)～(20:80)的乙腈～緩沖溶液，所述流動相B為乙腈；

所述乙腈～緩沖溶液中的緩沖溶液為pH值為2～2.4的醋酸銨和高氯酸鈉的混合溶液；

洗脫條件：洗脫時間及所述洗脫時間內所述流動相中的所述流動相B的體積含量如下：0～18min，0％；18～25min，0～30％；25～39min，30％；39～40min，30～0％；40～50min，0％；

配制硒元素的標準對照液；同條件進行色譜檢測，并按以下方式計算所述待測品溶液中所述物質成分的含量：

w物質成分＝(A測物質成分×m對物質成分)/(A對物質成分×m測)×100％；

其中，A測為待測品溶液中含硒物質的色譜峰面積，A對為對照液中含硒物質的色譜峰面積，m對為對照液中含硒物質的質量，m測為待測品溶液中含硒物質的質量。

優選地，分離過程中的柱溫為38～42℃。

優選地，分離過程中所述流動相A和所述流動相B的流速均為0.8～1.2mL/min。

優選地，所述液體注入高效液相色譜儀前，用極性溶劑稀釋至濃度為0.5～1.5mg/mL，離心，取上清液。

優選地，所述極性溶液為純化水或濃度為0.08～0.12mol/L的鹽酸。

優選地，所述待測品溶液注入所述高效液相色譜儀的體積為10～20μL。

優選地，所述纖維素酶與NaOH的質量比為3:2。

優選地，纖維素酶與NaOH的混合溶液中，NaOH的濃度為0.1-0.15mol/L。