[發明專利]新型親和嗜硫硅球色譜材料及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 201810134455.0
• 申請日: 2018-02-09
• 公開（公告）號: CN108371948A
• 公開（公告）日: 2018-08-07
• 發明（設計）人: 劉云春;呂韋韋
• 申請（專利權）人: 安徽師范大學
• 主分類號: B01J20/285
• 分類號: B01J20/285;B01J20/30;B01D15/08
• 代理公司: 北京潤平知識產權代理有限公司 11283
• 代理人: 鄒飛艷;張苗

本發明涉及色譜材料，具體地，涉及一種新型親和嗜硫硅球色譜材料及其制備方法和應用，其中，該制備方法包括：在強堿存在下，將如式Ⅰ所示的磺酰胺(SFA)和環氧基團修飾的硅球于第一溶劑中進行共聚反應，以制得共聚材料；其中所述環氧基團為該新型親和嗜硫硅球色譜材料機械性能強、易于儲存，分散性好，并且能夠對含二硫鍵化合物具有良好的特異性富集與分離能力，不僅如此，本發明的制備方法步驟簡單，原料易得，反應過程可控，非常利于推廣應用。

技術領域

本發明涉及色譜材料，具體地，涉及一種新型親和嗜硫硅球色譜材料及其制備方法和應用。

背景技術

蛋白質中的二硫鍵即S-S鍵是肽鏈內或肽鏈間兩個半胱氨酸的巰基氧化而成的鍵。二硫鍵能夠讓蛋白質中的肽鏈變得更加緊密，為維持蛋白質的高級結構，天然構象和生物活性提供了重要的基礎。真核生物內的二硫鍵蛋白普遍存在，二硫鍵可在構象上固定多肽鏈的骨架或改善其熱動力學穩定性，以抵抗高溫、強酸、強堿等傷害。因此，二硫鍵蛋白常被分泌到細胞外或錨定于細胞膜，它們適于作為治療藥物(如胰島素、抗體)或制藥產業的靶標蛋白。在生命科學領域含有二硫鍵的生物分子分布非常廣泛，如激素、酶、免疫球蛋白、血漿、抑制劑和毒液等，大部分已成為疾病診斷的重要標志物。但是這些樣品組成復雜，豐度低，檢測難度大。因此，采用合適的方法對其進行富集、濃縮、純化等前處理，能夠減少樣品的復雜性，提高檢測靈敏度，消除干擾。

親和色譜的用途非常廣泛(參見《Journal of Biological Chemistry》1970年第245期第3059-3065頁)，可用來分離純化細胞提取物中核酸、蛋白、血漿中抗體、重組蛋白等。嗜硫色譜法就是一類親和色譜，可有效的富集、濃縮與純化含二硫鍵的化合物。嗜硫色譜發展最早于1985年，Porath(參見《FEBS letters》1985年第185期第306-310頁)。在2004年，Yannick等(參見《Journal of Chromatography B》2004年第808期第51-56頁)利用二乙烯基砜在空纖維膜上修飾砜-硫醚基團，成功在復雜體系中富集純化了含二硫鍵的IgG。在2005年，Lakhiar等(參見《Journal of Chromatography B》2005年第818期第53-59頁)在硅球引入嗜硫基團與乙酰基神經氨酸，對老鼠腹水中的抗體的進行了有效的富集與純化。

優質的色譜分離材料應該具有機械強度高，表面易改性等特點。然而，現有的這些嗜硫色譜材料機械強度小，制作成本高，不易儲存，為了改善這些不足，本發明將嗜硫試劑引入到二氧化硅微球表面，結合硅球色譜材料機械性能好，易儲存的優點，提供一種新型親和嗜硫硅球色譜材料的制備方法并考察其應用。

發明內容

本發明的目的在于克服現有嗜硫色譜材料機械強度小，制作成本高，不易儲存的缺點，而提供一種新型親和嗜硫硅球色譜材料及其制備方法和應用，該新型親和嗜硫硅球色譜材料機械性能強、易于儲存，分散性好，并且能夠對含二硫鍵化合物具有良好的特異性富集與分離能力，不僅如此，本發明的制備方法步驟簡單，原料易得，反應過程可控，非常利于推廣應用。

為了實現上述目的，本發明提供了新型親和嗜硫硅球色譜材料的制備方法，所述制備方法包括：在強堿存在下，將如式Ⅰ所示的磺酰胺(SFA)和環氧基團修飾的硅球于第一溶劑中進行共聚反應，以制得共聚材料；其中所述環氧基團為

本發明還提供一種根據前文所述的制備方法制備得到的新型親和嗜硫硅球色譜材料。

不僅如此，本發明還提供一種根據前文所述的新型親和嗜硫硅球色譜材料在對含二硫鍵化合物進行特異性的富集與分離中的應用。