[發(fā)明專利]一種基于拉曼光譜-重水同位素標記的耐藥菌藥敏性快速檢測方法和判斷合理用藥的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810134176.4
• 申請日: 2018-02-09
• 公開（公告）號: CN108267436B
• 公開（公告）日: 2020-10-16
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 崔麗;楊凱;朱永官
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院城市環(huán)境研究所
• 主分類號: G01N21/65
• 分類號: G01N21/65
• 代理公司: 廈門市精誠新創(chuàng)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 35218
• 代理人: 秦華

1.一種基于拉曼光譜-重水同位素標記的耐藥菌藥敏性快速檢測方法，其特征在于，將待檢物在含有重水的培養(yǎng)液中孵育，其中培養(yǎng)液中含有抗生素的作為處理組，不含抗生素的作為對照組，將孵育后的待檢物離心清洗，之后將清洗后的待檢物滴在低拉曼背景基底上進行拉曼檢測，分別計算處理組和對照組的C-D/(C-D+C-H)值，并以處理組除以對照組的比值，即相對C-D峰強比值作為判別標準，若相對C-D峰強比值小于等于0.75，則判斷為對抗生素敏感，若相對C-D峰強比值大于0.75，則判別為對該抗生素耐藥；其中C-D和C-H峰分別位于2040-2300cm^-1和2800-3100cm^-1；所述培養(yǎng)液中抗生素的濃度為5至60倍的抗生素最小抑菌濃度MIC值；所述孵育的時間為 0.5至1小時。

2.如權(quán)利要求1所述基于拉曼光譜-重水同位素標記的耐藥菌藥敏性快速檢測方法，其特征在于：所述培養(yǎng)液中抗生素的濃度為10倍的抗生素最小抑菌濃度MIC值。

3.如權(quán)利要求1所述基于拉曼光譜-重水同位素標記的耐藥菌藥敏性快速檢測方法，其特征在于，所述培養(yǎng)液中重水占所有水的體積百分濃度是30％至100％。

4.如權(quán)利要求1所述的基于拉曼光譜-重水同位素標記的耐藥菌藥敏性快速檢測方法，其特征在于：所述孵育的時間為1小時。

5.如權(quán)利要求1所述基于拉曼光譜-重水同位素標記的耐藥菌藥敏性快速檢測方法，其特征在于，所述離心的條件為5000rpm，3分鐘； 所述離心的次數(shù)為兩次；所述清洗的清洗液為去離子水或70％乙醇。

6.如權(quán)利要求1所述基于拉曼光譜-重水同位素標記的耐藥菌藥敏性快速檢測方法，其特征在于，所述檢測的激發(fā)光波長為532、633、785nm，光柵300g/mm。

7.一種判斷合理用藥的方法，其特征在于，采用權(quán)利要求1-6任一項所述的基于拉曼光譜-重水同位素標記的耐藥菌藥敏性快速檢測方法，所述培養(yǎng)液為含不同抗生素和重水的培養(yǎng)液；根據(jù)處理組的相對C-D峰強比值作為判斷合理用藥的標準，若相對C-D峰強比值小于等于0.75，則判斷為對抗生素敏感，相對C-D峰強比值大于0.75，則判別為對該抗生素耐藥；所述方法是非治療或診斷目的的。