[發明專利]衍生化多種有機酸測定試劑盒及其使用方法

在審

• 申請號: 201810133982.X
• 申請日: 2018-02-09
• 公開（公告）號: CN108414651A
• 公開（公告）日: 2018-08-17
• 發明（設計）人: 楊江濤;趙明;林珊珊;戴子鵬;孫智勇;黃麗娟
• 申請（專利權）人: 深圳愛灣醫學檢驗實驗室
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/88
• 代理公司: 深圳市六加知識產權代理有限公司 44372
• 代理人: 羅水江

本發明涉及氣質聯用診斷試劑盒技術領域，公開一種衍生化多種有機酸測定試劑盒及其使用方法，該試劑盒包括校正品、內標物質控品混標，肟化試劑，萃取液，衍生化試劑，空白試劑，酸堿pH試紙，干燥劑，玻璃內插管；通過采用試劑盒檢測有機酸含量，不僅可以節約檢測前配置檢測有機酸所用試劑的時間，而且，避免了不同工作人員與不同條件下人為配置試劑的誤差，并且采用試劑盒檢測有機酸的結果滿足回收率和準確率的要求。

技術領域

本發明涉及氣質聯用診斷試劑盒技術領域，具體涉及一種衍生化多種有機酸測定試劑盒及其使用方法。

背景技術

遺傳性代謝病(inborn error of metabolism，IEM)是一類涉及氨基酸、有機酸、脂肪酸、尿素循環等多種物質代謝的疾病。其單一病種患病率較低，但由于種類繁多，總體發病率較高。該類疾病通常表現為不明原因的反復嘔吐、抽搐、肌張力低下、智力發育落后等。遺傳性代謝病的診斷主要依賴實驗室的特異性檢查，GC-MS技術的發展使得這類疾病在發病前進行干預成為可能。

人體尿液中含有有機酸等內源性化合物的終末或中間代謝產物，這些有機化合物在尿液中濃度通常高于其在血清和其他組織體液，另外尿標本最易于收集，為非侵入性操作性技術，為國內外研究者所認同。二十世紀我國對遺傳代謝性疾病僅能進行初步檢測，依賴歐日美等發達國家的檢測技術且需將標本送至國外合作單位方可確診；近十年來我國引進氣相色譜—質譜聯用(gaschromatography massspectrometry，GC-MS)尿有機酸檢測方法開始逐步應用于有機酸類遺傳代謝性疾病的篩查、監測和診斷。

目前，新生兒遺傳代謝性疾病的篩查、監測和診斷主要采用兩種方法，分別為：串聯質譜法檢測干血斑中多種氨基酸、肉堿和各實驗室自配試劑進行氣相色譜質譜檢測尿濾紙中有機酸；其中串聯質譜法檢測主要針對于氨基酸、酰基肉堿相關的疾病特異性較強，準確率高，但針對于有機酸相關的遺傳代謝病特異性不高，易出現誤診、漏診的可能。各實驗室自配試劑進行氣相色譜質譜檢測有機酸因各醫院、實驗室配制條件參差不齊，且存在人為配制試劑的誤差，沒有統一的質控品檢測線，從而無法保證實驗結果的準確性。氣相色譜質譜尿液有機酸檢測所需的十余種試劑，配制復雜費時，且易造成試劑浪費，污染環境。另外，該傳統的氣相色譜質譜尿液有機酸檢測實驗前處理過程需要4-5個小時，耗時太長，不利于遺傳代謝病疑似陽性患兒的及時治療。

實現本發明實施例的過程中，發明人發現相關技術中至少存在如下問題：

檢測有機酸所用的試劑配制復雜、費時，而且配制時存在一定的人為配置誤差，影響測試結果的準確性。

發明內容

本發明實施例提供一種衍生化多種有機酸測定試劑盒及其使用方法，解決了檢測有機酸時所用的試劑配置復雜、費時，使得測試結果誤差較小，測試結果滿足回收率和準確率的要求。

為了解決上述技術問題，本發明實施例采用的一個技術方案是：

第一方面，本發明提供一種衍生化多種有機酸測定試劑盒，包括：校正品、內標物質控品混標，肟化試劑A，肟化試劑B，萃取液，衍生化試劑，空白試劑，酸堿pH試紙，干燥劑，玻璃內插管；所述校正品采用C9-C28的正構烷烴混合標準品稀釋液，所述內標物質控品混標包括：純乙酸乙酯，十七烷酸，2-苯基-3-羥基丙酸和二十四烷，其中純乙酸乙酯為稀釋液，所述衍生化試劑包括N，O-雙(三甲基硅烷基)-2，2，2-三氟乙酰胺與三甲基氯硅烷；所述N，O-雙(三甲基硅烷基)-2，2，2-三氟乙酰胺與三甲基氯硅烷的體積比為(90—99)：(1—10)。

優選地，述N，O-雙(三甲基硅烷基)-2，2，2-三氟乙酰胺與三甲基氯硅烷的體積比為99:1。

優選地，所述正構烷烴標準品濃度為8-12mg/L。

優選地，所述肟化試劑A為鹽酸羥胺，所述鹽酸羥胺的含量為4％-6％；所述鹽酸羥胺用于參與肟化反應。