[發明專利]一種磁珠法骨骼基因組DNA提取試劑盒在審
| 申請號: | 201810130770.6 | 申請日: | 2018-02-08 |
| 公開(公告)號: | CN108048454A | 公開(公告)日: | 2018-05-18 |
| 發明(設計)人: | 李微微;魯明;遲翔宇;吳冰 | 申請(專利權)人: | 天津威高分子診斷科技有限公司 |
| 主分類號: | C12N15/10 | 分類號: | C12N15/10 |
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| 地址: | 300000 天津市濱海*** | 國省代碼: | 天津;12 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 磁珠法 骨骼 基因組 dna 提取 試劑盒 | ||
本發明提供一種磁珠法骨骼基因組DNA提取試劑盒,包括裂解結合液、磁珠、第一漂洗液、第二漂洗液、第三漂洗液和DNA洗脫液,本發明利用磁珠法對骨骼基因組DNA進行提取,其中裂解結合液能夠快速的為磁珠結合DNA提供穩定的環境,大大增強了提取效率,另外采用96孔預分裝深孔板模式,能夠結合全自動核酸提取儀進行全自動DNA提取,與傳統的DNA提取方法相比,極大的縮短了提取所需的時間和人力勞動,提高了整體的提取效率。
技術領域
本發明屬于DNA提取技術領域,尤其是涉及一種磁珠法骨骼基因組DNA提取試劑盒。
背景技術
由于骨骼的特殊組織結構能夠減緩DNA降解和污染,因此在其他檢材條件不具備的情況下,骨骼DNA的分型檢驗則更多地被應用于案件鑒定中,但骨骼的結構特殊使其DNA的提取、純度難度較大,一些傳統的骨骼DNA提取方法,操作步驟復雜,且容易接觸有毒有害試劑,硅珠法提取陳舊骨骼DNA,操作相對簡單,但需要多次離心,難免造成樣本的損失,因此,目前磁珠法提取骨骼DNA開始被應用,但是目前有些磁珠法提取純化骨骼DNA的效果不好,嚴重影響后續PCR擴增及檢測。
發明內容
本發明要解決的問題是提供一種能夠滿足檢測純度、提取速度快、提取效率高的磁珠法骨骼基因組DNA提取試劑盒。
為解決上述技術問題,本發明采用的技術方案是:一種磁珠法骨骼基因組DNA提取試劑盒,其特征在于:包括裂解結合液、異丙醇、磁珠、第一漂洗液、第二漂洗液、第三漂洗液和DNA洗脫液。
進一步地,所述裂解結合液的組份包括5mol/L的鹽酸胍、50mmol/L的三羥甲基氨基甲烷緩沖液、20mmol/L的EDTA溶液和100mmol/L的氯化鈉,其中,所述三羥甲基氨基甲烷緩沖液和EDTA溶液的pH值均為8.0。
進一步地,所述第一漂洗液的組份包括15mmol/L的三羥甲基氨基甲烷緩沖液和5mmol/L的EDTA溶液,其中所述三羥甲基氨基甲烷緩沖液和EDTA溶液的pH值均為8.0。
進一步地,所述第二漂洗液的組份包括0.5mmolEDTA溶液、5mmol/L的Tris-HCl緩沖液和質量濃度為30%的無水乙醇,其中所述EDTA溶液和Tris-HCl緩沖液的pH值均為8.0。
進一步地,所述第三漂洗液的組份為質量濃度為70%的無水乙醇。
進一步地,所述DNA洗脫液的組份包括10mmol/L的三羥甲基氨基甲烷緩沖液和1mmol的EDTA溶液,所述三羥甲基氨基甲烷緩沖液和EDTA溶液的pH值均為8.0。
進一步地,所述磁珠的直徑在5nm-80nm之間,所述磁珠的表面分別鍵合硅羥基、環氧基、鄰二醇基和羧基。
進一步地,所述試劑盒采用96孔預分裝深孔板模式,第1列和第7列預分裝的是裂解結合液和異丙醇,第2列和第8列預分裝的是磁珠,第3列和第9列預分裝的是第一漂洗液,第4列和第10列預分裝的是第二漂洗液,第5列和第11列預分裝的第三漂洗液,第6列和第12列預分裝的是DNA洗脫液。
與現有技術相比,本發明具有的優點和有益效果是:
1、本發明利用磁珠法對骨骼基因組DNA進行提取,其中裂解結合液能夠快速的為磁珠結合DNA提供穩定的環境,大大增強了提取效率;
2、本發明采用96孔預分裝深孔板模式,能夠結合全自動核酸提取儀進行全自動DNA提取,與傳統的DNA提取方法相比,極大的縮短了提取所需的時間和人力勞動,提高了整體的提取效率。
附圖說明
圖1是本發明一種磁珠法骨骼基因組DNA提取試劑盒提取DNA后純度檢測曲線圖。
具體實施方式
下面對本發明的具體實施方式作詳細說明。
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