[發明專利]一種檢測臨床常見病原微生物的蛋白芯片及其制備方法

在審

• 申請號: 201810128620.1
• 申請日: 2018-02-08
• 公開（公告）號: CN108387727A
• 公開（公告）日: 2018-08-10
• 發明（設計）人: 成舜;施啟堯;丁俊杰;泮鋒綱
• 申請（專利權）人: 江蘇三聯生物工程有限公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/535;G01N21/76
• 代理公司: 無錫華源專利商標事務所(普通合伙) 32228
• 代理人: 聶啟新

1.一種檢測臨床常見病原微生物的蛋白芯片，其特征在于所述蛋白芯片通過如下步驟制得：

(1)黑玻片預處理；

(2)點樣抗體溶液；

(3)封閉抗體溶液，制得所述蛋白芯片。

2.根據權利要求1所述的蛋白芯片，其特征在于步驟(1)中所述黑玻片預處理的方法為：

①將黑玻片置于含有NaOH的玻片預處理液中浸泡16～24h，之后采用純化水清洗2～8次；

②將黑玻片置于質量濃度為0.05～1wt％的硅烷水溶液中浸泡20～60min；

③將浸泡好的黑玻片放入烘箱中，于100～180℃條件下烘烤0.2～0.6h。

3.根據權利要求1所述的蛋白芯片，其特征在于步驟(2)中所述抗體溶液包括大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、沙門氏菌、假單胞菌、霍亂弧菌、克雷伯菌、李斯特菌、鏈球菌、志賀菌、腺病毒、鮑曼不動桿菌、溶血葡萄球菌的抗體溶液。

4.根據權利要求1所述的蛋白芯片，其特征在于步驟(2)中所述點樣的方法為機器自動化點樣，在黑玻片上點成4×14的矩陣；每列為同一菌種抗體溶液形成的點。

5.根據權利要求1所述的蛋白芯片，其特征在于步驟(3)中所述封閉過程為：將點樣好的黑玻片沒入封閉液中1～4h，之后取出黑玻片，并離心去除殘余封閉液，制得所述蛋白芯片。

6.根據權利要求5所述的蛋白芯片，其特征在于所述封閉液為含有封閉蛋白的緩沖溶液；所述封閉蛋白為牛血清白蛋白或卵清蛋白；所述緩沖液為PBS緩沖液、Tris緩沖液、HEPS緩沖液、MOPS緩沖液中的一種或多種。

7.一種權利要求1～6任一項所述蛋白芯片的應用，其特征在于將所述蛋白芯片制成試劑盒。

8.根據權利要求7所述的應用，其特征在于所述試劑盒還包括標記有HRP酶的第二抗體溶液、檢測液A和檢測液B。

9.根據權利要求8所述的應用，其特征在于所述檢測液A含有1％過氧化氫，檢測液B含有1％魯米諾和2％Tris。