[發明專利]一株indicus不動桿菌及其解磷方法

有效

• 申請號: 201810128520.9
• 申請日: 2018-02-08
• 公開（公告）號: CN108373982B
• 公開（公告）日: 2021-03-19
• 發明（設計）人: 李文;王陶;董玉瑋;陳玲;李同祥;高明俠;張傳麗;劉洵
• 申請（專利權）人: 徐州工程學院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C05F11/08;C12R1/01
• 代理公司: 北京淮海知識產權代理事務所(普通合伙) 32205
• 代理人: 周敏

本發明公開了一株indicus不動桿菌及其解磷方法，該菌株的分類命名為Acinetobacter indicus JL?1，保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏編號為GDMCC No.60312。該菌株的解磷方法是：將保存的JL?1轉接至LB斜面培養基中，30℃活化培養24h；用接種環刮取斜面菌株接入種子培養基中，30℃、150r/min振蕩培養24h得種子液；以1％(v/v)接種量將種子液接入無機磷液體培養基中，裝液量為30～120mL/250mL，pH 6.5～7.5、25～40℃、120～150r/min振蕩培養24～96h。本發明菌株適應能力較強，繁殖快，培養條件簡單，對難溶性的無機磷酸鹽Ca₃(PO₄)₂具有較強的溶解能力，在最優解磷條件下，該菌株解磷量為61.02μg/mL，菌落數11.43log(CFU/mL)，具有廣泛的應用前景。

技術領域

本發明屬于農業微生物技術領域，涉及一株不動桿菌，具體涉及一株indicus 不動桿菌及其解磷方法。

背景技術

磷是植物成長進程中的一種重要元素，廣泛地參加植物細胞內多種生理生化 進程，能夠顯著地促進植物生長發育和新陳代謝過程。我國大約有74％的耕地缺 磷，施入的磷肥當季作物利用率為5％～25％。大部分磷與土壤中的Ca²⁺、Fe³⁺、 Fe²⁺、Al³⁺結合，形成難溶性磷酸鹽，因而大部分磷肥以難溶的無效態在土壤中 積累。土壤中存在大量的解磷菌，包括細菌、放線菌和酵母菌，它們能將難溶性 的磷轉化為農作物可吸收使用的可溶性磷，促進農作物生長，改善土壤環境，顯 著提高土壤中的有效磷含量，因此，解磷菌的研究與應用對于農業生產具有重要 的理論和實踐意義，有助于緩解我國土壤磷素缺乏和環境污染問題。

解磷菌的解磷過程是個復雜的過程，解磷機理比較復雜，不同的解磷菌所具 有的解磷能力也有所不同，因此，有必要從自然條件下的植株根際篩選高效的解 磷菌，挖掘土壤磷庫資源。

發明內容

本發明的目的之一是提供一株indicus不動桿菌，其具有較強的解磷能力。

本發明的目的之二是提供上述indicus不動桿菌在溶解難溶性無機磷酸鹽中 的應用。

本發明的目的之三是提供上述indicus不動桿菌的解磷方法，能在復雜的環 境條件下發揮其解磷能力。

為實現上述目的，本發明提供一株indicus不動桿菌，其分類命名為Acinetobacter indicus JL-1，保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，地址是廣東省廣 州市先烈中路100號大院59號樓5樓，保藏日期為2018年1月8日，保藏編 號為GDMCC No.60312。

該菌株Acinetobacter indicus JL-1是從徐州豐縣牛蒡根際土壤中純化、篩選得到，經鑒定為革蘭氏陰性菌，顯微鏡下可見菌株菌體為桿狀，菌落呈淡黃色， 略微凸起，邊緣不整齊，菌落表面較濕潤，明膠液化、淀粉水解、葡萄糖產酸、 甲基紅試驗、過氧化氫酶試驗呈陽性，吲哚、V.P.試驗呈陰性。

菌株16S rDNA序列構建的系統發育樹分析表明，菌株JL-1位于 Acinetobacterindicus分支上，結合生理生化試驗將JL-1鑒定為不動桿菌屬細菌。

所述的indicus不動桿菌在溶解難溶性無機磷酸鹽中的應用。所述的難溶性 無機磷酸鹽為磷酸鈣。

所述的indicus不動桿菌的解磷方法，包括以下步驟：

(1)將-80℃保存的菌株Acinetobacter indicus JL-1轉接于已滅菌的LB斜面 培養基中，置于30℃恒溫培養箱中活化培養24h；所述的LB斜面培養基為：蛋 白胨5.0g、NaCl5.0g、牛肉浸膏2.50g、瓊脂1.8g、蒸餾水500mL，pH7.0左右， 121℃滅菌20min；