[發明專利]一種遞送分子及納米顆粒、制備方法、用途

有效

• 申請號: 201810124807.4
• 申請日: 2018-02-08
• 公開（公告）號: CN108424437B
• 公開（公告）日: 2021-06-22
• 發明（設計）人: 李軍偉;劉光輝;劉玉萍;單虎
• 申請（專利權）人: 青島農業大學
• 主分類號: C07K14/00
• 分類號: C07K14/00;A61K9/14;A61K47/64;A61K31/713;A61P31/16
• 代理公司: 北京冠和權律師事務所 11399
• 代理人: 李建華

本發明提供的一種遞送分子及納米顆粒、制備方法、用途，所述遞送分子包括細胞穿膜肽，在所述細胞穿膜肽的C端或N端鏈接有聚精氨酸，所述遞送分子可以與siRNA等核苷酸、蛋白質、DNA結合形成直徑為600nm大小的納米顆粒，可以轉染入細胞內和動物模型體內，并將siRNA遞送至細胞內，釋放出siRNA發揮治療作用，表明本發明所述的遞送分子無論在細胞水平和動物水平上，均可以將遞送物遞送至細胞內或動物體內，并釋放遞放物發揮作用，所述遞送分子無毒，遞送效率高。

技術領域

本發明屬于藥物制劑技術領域，具體涉及一種遞送分子及納米顆粒、制備方法、用途。

背景技術

由于細胞具有復雜的膜系統，導致多核苷酸及其它細胞膜不可滲透性的藥物向活細胞內遞送時受到限制。常用的反義、RNAi及基因療法的藥物是相對較大的親水性聚合物且常帶較高負電荷，而親水性和較高負電荷兩種物理特征都嚴重的限制了這些藥物跨越細胞膜直接擴散。因此，多核苷酸以及其他藥物的遞送的主要障礙是跨細胞膜向細胞質或核的遞送。

目前，已經開發出能在體外實現適度有效遞送多核苷酸至細胞內的眾多轉染試劑，然而使用這些相同轉染試劑在體內傳遞多核苷酸很復雜且因體內毒性、不利的血清相互作用或不良靶向而變得無效。用于體內遞送小核酸的另一種手段是將核酸連接于小靶向分子、脂質或固醇上，盡管使用上述共軛物已經觀測到一定的遞送及活性，但利用上述的方法需要極大的核酸劑量，導致毒性和嚴重的副作用。如siRNA等藥物目前在應用上存在的最大問題是在細胞水平siRNA的運送效率低，而在動物水平上運送效率更低，若提高治療效果則需要加大siRNA的量，而這樣就會增加siRNA的毒性。因此，目前對于如何提高siRNA等藥物的遞送效率以及降低其毒性是siRNA等藥物應用的關鍵。因此，目前遞送多核苷酸等藥物跨細胞膜所要解決的問題為：(1)遞送分子的有毒性；(2)多核苷酸等藥物在低劑量下遞送效率低。

為提供一種無毒、多核苷酸等藥物在低劑量下遞送效率高的遞送分子，科研人員提出了不同的方法，包括脂質、聚陽離子納米顆粒和基于肽的制劑，但是這些技術中僅少數在體內有效且已經達到臨床水平。

發明內容

因此，本發明要解決的技術問題在于克服現有技術中的遞送系統存在毒性以及遞送效率低的問題，從而提供一種無毒且遞送效率高的遞送分子及納米顆粒、制備方法、用途。

本發明提供了一種遞送分子，包括細胞穿膜肽，在所述細胞穿膜肽的C端或N端鏈接有聚精氨酸。

優選的，在所述細胞穿膜肽的C端鏈接有聚精氨酸。由于所述細胞穿膜肽的C端含有多個正電荷氨基酸，尤其是transpotan C端含有多個正電荷氨基酸，是結合siRNA的主要部位，所以將聚精氨酸連載C端。

所述的遞送分子，所述聚精氨酸如dRn表示，所述dR為精氨酸，所述7≤n≤10。

所述的遞送分子，所述n＝9。

所述的遞送分子，所述細胞穿膜肽選自透膜肽Transpotan、透膜肽PTD、缺陷病毒蛋白轉到肽TAT、源于果蠅觸角基因同源結構域的十六肽Penetratin、SynB1、SynB3、PTD-4、PTD-5、D-Tat、MAP、SBP、FBP、MPG、Pep-1或Pep-2中的任意一種。

所述的遞送分子，所述細胞穿膜肽為透膜肽Transpotan。

本發明提供了一種納米顆粒，包括：

遞送物；和所述的遞送分子。

所述的納米顆粒，所述遞送物選自肽、蛋白質、核酸、藥物、前藥或治療分子。優選的，所述遞送物選自短肽、核酸或治療分子。

所述的納米顆粒，所述核酸選自siRNA、miRNA、DNA質粒或其類似物。