[發明專利]一種單加氧酶突變體及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201810123656.0
• 申請日: 2018-02-07
• 公開（公告）號: CN108300707B
• 公開（公告）日: 2019-09-13
• 發明（設計）人: 洪浩;詹姆斯·蓋吉;盧江平;焦學成;張娜;李瑞;張克儉;張瑜
• 申請（專利權）人: 凱萊英醫藥集團（天津）股份有限公司
• 主分類號: C12N9/02
• 分類號: C12N9/02;C12N15/53;C12P17/12
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 鞏克棟

1.一種單加氧酶突變體，其特征在于，其氨基酸序列為SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列經一個或幾個氨基酸取代獲得的氨基酸序列；

所述一個或幾個氨基酸取代選自下組中的任意一種：

S500I、M25A-S500I、S500I-P106R、S500I-A265E、S500I-A474E、S500I-Q490K、S500I-A265E-M25A、S500I-A265E-P106R、S500I-A265E-A474E、S500I-A265E-Q490K、S500I-A265E-M25A-A474E、S500I-A265E-M25A-Q490K、S500I-A265E-M25A-A474E-P106R、S500I-A265E-M25A-Q490K-P106R、S500I-A265E-M25A-A474E-Q490K、S500I-A265E-M25A-A474E-Q490K-I495A或S500I-A265E-M25A-I495A；

其中，所述突變體具有單加氧酶的活性。

2.編碼如權利要求1所述的單加氧酶突變體的核酸分子。

3.一種表達載體，其特征在于，所述表達載體含有至少一個拷貝的如權利要求2所述的核酸分子。

4.一種宿主細胞，其特征在于，所述宿主細胞含有權利要求3所述的表達載體。

5.一種制備如權利要求1所述的突變體的方法，其特征在于，包括：

(1)制備重組宿主細胞，其中所述細胞包含DNA分子，所述DNA分子包含編碼根據權利要求1所述突變體的核酸分子；

(2)在適合表達所述突變體的培養基中孵育所述宿主細胞；

(3)從所述培養基中回收步驟(2)中由所述宿主細胞表達的所述突變體的多肽。

6.一種組合物，其特征在于，所述組合物包括如權利要求1所述的突變體的多肽。

7.根據權利要求6所述的組合物，其特征在于，所述組合物為干粉、片劑或液體中的任意一種。

8.一種如權利要求1所述的突變體在制備手性藥物中的應用。