[發明專利]抗輪狀病毒感染的真核細胞膜包覆仿生納米粒及其制備方法

有效

• 申請號: 201810122851.1
• 申請日: 2018-02-07
• 公開（公告）號: CN108338977B
• 公開（公告）日: 2020-06-09
• 發明（設計）人: 李桂玲;魏瀟萌;丁維明;于菲菲;牛霞;周文凱
• 申請（專利權）人: 中國醫學科學院醫藥生物技術研究所
• 主分類號: A61K9/50
• 分類號: A61K9/50;A61K47/04;A61P31/14
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;任鳳華

本發明公開了抗輪狀病毒感染的真核細胞膜包覆仿生納米粒及其制備方法。該抗輪狀病毒感染的細胞膜仿生納米粒由外殼和所述外殼包覆的內核組成，所述外殼為真核細胞膜，所述內核為介孔二氧化硅納米粒，所述真核細胞膜為Caco?2細胞膜或MDCK細胞膜。該抗輪狀病毒感染的真核細胞膜包覆仿生納米粒能有效降低輪狀病毒(RV)對正常小腸細胞的侵染。

技術領域

本發明涉及生物技術領域中抗病毒感染的真核細胞膜包覆仿生納米粒及其制備方法。

背景技術

嬰幼兒腹瀉是造成全球五歲以下兒童死亡的第二大原因，僅次于呼吸道感染，其中輪狀病毒(Rotavirus，RV)感染是引起嬰幼兒重癥腹瀉和脫水的首要原因。目前對于RV感染所致腹瀉尚無特效藥，現階段臨床主要采取對癥治療手段，主要通過及時補液、補水以及使用微生態制劑(如益生菌)、廣譜抗病毒藥物、免疫調節劑、消化道黏膜保護劑等來降低或減輕患者的腹瀉、嘔吐等癥狀。

疫苗接種成為有效且唯一的預防控制RV感染所致腹瀉的手段。我國使用的是由蘭州生物制品研究所研制并于2001年上市的口服輪狀病毒單價疫苗羅特威，另外還有葛蘭素史克公司生產的Rotarix和默克公司研發的RotaTeq。這些疫苗均為口服減毒活疫苗，在人體內仍有因發生逆行突變而恢復毒力的可能，存在一定風險性，而且在2013年世界衛生組織的立場文件中也確認輪狀病毒疫苗存在腸套疊風險。

RV病毒是一種雙鏈核糖核酸病毒，屬于呼腸孤病毒科，且RV毒株多樣化，根據重要的結構蛋白VP6種類，將RV病毒分A-G 7個組。其中A、B、C均可以感染人類，但目前應用于臨床的RV疫苗均為針對A組開發的。VP7是RV另一種重要蛋白，依VP7可區分病毒G血清型，至今已經鑒定有14個血清型。因為不同流行株的血清型不同，而疫苗毒株單一，所以常常出現接種疫苗后嬰幼兒仍被RV感染的情況。因此，預防和治療RV感染的有效藥物或遞送系統成為臨床急需，對其進行研究開發有著重要意義。另外在RV的感染機制研究中，RV在體內主要感染小腸上皮細胞，體外也僅能感染腸上皮細胞和腎上皮細胞，但細胞膜表面可能存在多種RV受體，研究發現唾液酸、神經調節脂、熱休克蛋白、多種整合素等都在RV感染過程中發揮了重要作用，但相互作用復雜，難以找到合適的受體阻斷藥物來有效控制RV感染。

現代藥物傳遞系統可選擇性地將藥物遞送至病灶部位而發揮療效，目前采用的大多為合成載體，雖可根據使用目的進行各種結構修飾，但不具備人體內源性物質的復雜性和一些功能性，且有時會被機體視為外源性毒物排出體外而無法發揮作用。近年來，細胞膜仿生納米粒(cell membrane-camouflaged nanoparticles)引起了研究者們極大關注，它將合成的納米粒與天然生物材料結合在一起，將二者的優勢互補，形成了一種新型仿生藥物遞送系統。細胞膜仿生納米粒主要通過采用天然細胞膜作為外殼來包載合成的納米粒內核而實現。通過這一策略，細胞膜的結構與功能得以保留；而合成的納米粒作為核心，不但起支撐作用，還可以載藥或進行結構修飾。近年國內外關于細胞膜仿生納米粒的文獻報道中，采用的細胞膜有紅細胞膜、白細胞膜、腫瘤細胞膜、細菌細胞膜等。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是如何抗輪狀病毒感染。

為了解決以上技術問題，本發明提供了抗輪狀病毒感染的細胞膜仿生納米粒。

本發明所提供的抗輪狀病毒感染的細胞膜仿生納米粒，所述細胞膜仿生納米粒由外殼和所述外殼包覆的內核組成，所述外殼為真核細胞膜，所述內核為介孔二氧化硅納米粒，所述真核細胞膜為Caco-2細胞膜或MDCK細胞膜。

上述細胞膜仿生納米粒中，Caco-2細胞為人結腸癌上皮細胞，MDCK細胞為犬腎遠曲小管上皮細胞(Madin-darby canine kidney)。

上述細胞膜仿生納米粒中，所述細胞膜仿生納米粒的粒徑(直徑)可為80-120nm(如90-96nm或93-95nm)；其多分散系數可為≤0.3(如≤0.25或≤0.2)。