[發明專利]一種艾滋病免疫吸附治療細胞株的制備

在審

• 申請號: 201810120368.X
• 申請日: 2018-02-05
• 公開（公告）號: CN108103028A
• 公開（公告）日: 2018-06-01
• 發明（設計）人: 翁炳煥;李蘭娟;洪雪娟;虞曉鵬;毛愉嬋;朱丹華
• 申請（專利權）人: 翁炳煥
• 主分類號: C12N5/16
• 分類號: C12N5/16;A61P31/18
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

一種用于生物醫學領域的艾滋病免疫吸附治療細胞株的制備，其特征在于，以免疫磁珠法分選CD4+T細胞和巨噬細胞，與骨髓瘤細胞(SP2/0)同置于含有PHA、刀豆蛋白A、IFN?γ、SP2/0?IgG、CD4?IgG的預融合劑中，在PHA活化T細胞、刀豆蛋白A改變胞膜易融性、IFN?γ活化巨噬細胞IgGFc受體的共同作用下，使CD4?IgG的IgGFab段與具有CD4表位的CD4+T細胞結合，而其IgGFc段與具有IgGFc受體的巨噬細胞結合，SP2/0?IgG的IgGFab段與SP2/0結合，而其IgGFc段與具有IgGFc受體的巨噬細胞結合，形成CD4+T細胞?CD4?IgG?巨噬細胞?IgG?SP2/0結合物，進而在融合劑的作用下使3種細胞融合，經細胞融合選擇培養基(HAT)培養，獲得能長期傳代、產生細胞因子、圍吞HIV的艾滋病免疫吸附治療細胞株。

技術領域

本發明涉及生物醫學領域中艾滋病的生物細胞治療。

背景技術

艾滋病是由人類免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus，HIV)引起的傳染病，在全球廣泛流行，根據世界衛生組織(WHO)和聯合國艾滋病規劃署的有關報告，自1981年美國發現首例艾滋病病例以來，至今全球有208個國家和地區受到了艾滋病的嚴重威脅，約有4000萬人感染了艾滋病，死亡人數已超過2000萬，每天約有6000人成為艾滋病感染者，同時每天約有300多人死于艾滋病。在中國HIV感染者正處于高速增長期，目前已遠超過100萬。艾滋病已經成為繼腫瘤、心腦血管疾病、結核病、糖尿病后又一個人類面臨的重大感染性疾病，已成為全球關注的嚴重的公共衛生和社會問題。

從目前已用于臨床的艾滋病治療方法看，效果不那么理想：(1)HIV逆轉錄酶抑制劑：僅能防止尚未感染HIV的易感細胞感染，對已感染的細胞沒有治療作用，且毒副作用較多，包括腺粒體毒性、骨髓抑制、紅細胞性貧血、粒細胞和血小板減少、胰腺炎，加之交叉耐藥性的產生，這類藥已不單獨使用，主要做聯合用藥，且易產生耐藥變株，導致臨床療效下降或失效。(2)HIV蛋白酶抑制劑：易產生藥物性肝損傷、脂質代謝紊亂等毒副作用及耐藥性。(3)HIV整合酶抑制劑：通過抑制HIV病毒DNA與宿主細胞DNA整合而發揮作用，與HIV逆轉錄酶抑制劑和蛋白酶抑制劑聯合同時使用對抗病毒有協同作用。(4)抑制HIV病毒進入抑制劑：包括阻斷gp120與CD4結合、阻斷HIV與輔助受體結合、作用于gp41膜亞單位及作用于T淋巴細胞表面CC趨化因子受體5(CCR5)來阻斷HIV進入宿主細胞，但對肝和心臟有副作用。(5)細胞因子治療：主要用于調節T細胞動態平衡。(6)HIV疫苗治療：由于HIV的特殊性，如固有免疫不足以抵御HIV及其靶向破壞免疫系統，病毒突變迅速，導致至今尚未開發出真正安全有效的疫苗。(7)基因治療：HIV基因治療的研究從未間斷，包括反義技術、RNA誘餌、RNA干擾、細胞內抗體、顯性陰性突變體、自殺基因等，但進入II期臨床試驗階段的基因療法幾乎沒有。(8)單克隆抗體被動免疫療法：通過下調CD4+T細胞表面CCR5來降低HIV的易感性、延緩艾滋病的進展和減少HIV的擴散，中和單克隆抗體2G12、2F5和4E10應用于HIV感染者具有良好的耐受性和安全性，能延緩但不能阻止病毒的反彈(9)過繼性免疫細胞治療：體外大量培養HIV自體的CD4+T細胞時會導致病毒大量擴增，增加病毒感染的CD4+T細胞數量，而回輸CD4+T細胞可能會增加體內病毒復制的場所，導致病毒載量反彈，總體上看，過繼性免疫細胞治療無明顯的毒副作用，也未取得滿意的治療效果。