[發明專利]一種制備雷公藤乙素和2-表雷公藤乙素的方法

有效

• 申請號: 201810117628.8
• 申請日: 2018-02-06
• 公開（公告）號: CN108191948B
• 公開（公告）日: 2019-04-02
• 發明（設計）人: 賴旭宇
• 申請（專利權）人: 海門市彼維知識產權服務有限公司
• 主分類號: C07J73/00
• 分類號: C07J73/00
• 代理公司: 長沙新裕知識產權代理有限公司 43210
• 代理人: 趙超

本發明公開了一種制備雷公藤乙素和2?表雷公藤乙素的方法。存在于雷公藤中的雷公藤內酯酮、雷公藤甲素、雷公藤乙素和2?表雷公藤乙素結構非常接近，其中雷公藤乙素和2?表雷公藤乙素為一對手性異構體，分離難度大。現有技術在分離這四種化合物時，無不依賴于反復硅膠柱層析，然而反復硅膠柱層析耗費溶劑、重現性差，只適合于實驗室少量分離，難以在工業生產中推廣。目前工業生產中，唯一在使用的柱色譜只有大孔樹脂。本發明提供的方法不依賴于反復硅膠柱層析即可分離制備雷公藤內酯酮、雷公藤甲素、雷公藤乙素和2?表雷公藤乙素。本發明提供的HPLC方法基于常規的C18色譜柱即可有效分離手性異構體雷公藤乙素和2?表雷公藤乙素，成本低、重復性高。

技術領域

本發明屬于化學領域，涉及已知化合物的制備方法和分離分析方法，具體涉及一種制備雷公藤內酯酮、雷公藤甲素、雷公藤乙素和2-表雷公藤乙素的方法以及雷公藤乙素和2-表雷公藤乙素的HPLC分離分析方法。

背景技術

研究發現，存在于雷公藤中的四種結構非常類似的化學成分具有優異的抗腫瘤活性，分別為：雷公藤內酯酮、雷公藤甲素、雷公藤乙素和2-表雷公藤乙素。結構式如下：

從化學結構可以發現，這四個化合物結構非常接近，其中雷公藤乙素和2-表雷公藤乙素為一對手性異構體。這導致這四個化合物的分離難度非常大。現有技術在分離這四種化合物時，無不依賴于反復硅膠柱層析，然而反復硅膠柱層析耗費溶劑、重現性差，只適合于實驗室少量分離，難以在工業生產中推廣。目前工業生產中，唯一在使用的柱色譜只有大孔樹脂。

因此，一種基于大孔樹脂的分離方法有助于實現上述四種化合物的工業化生產制備。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術的不足，提供一種制備雷公藤內酯酮、雷公藤甲素、雷公藤乙素和2-表雷公藤乙素的方法及雷公藤乙素和2-表雷公藤乙素的HPLC分離分析方法。

本發明的上述目的是通過下面的技術方案得以實現的：

雷公藤內酯酮的制備：

一種制備雷公藤內酯酮的方法，包括如下步驟：

步驟S1，提取：將衛矛科植物雷公藤的干燥根粉碎，乙醇溶液冷浸提取，回收提取液中的乙醇并用水稀釋，過濾，收集濾液作為大孔樹脂上樣液；

步驟S2，XDA-1B大孔吸附樹脂富集：以XDA-1B大孔吸附樹脂為分離介質并裝柱，樹脂徑高比為1:10，拌樣樹脂占樹脂總量的1/10，濕法裝柱，拌樹脂上樣；先用12BV的35％乙醇以12BV/h的流速清洗，后用8BV的75％乙醇(含萬分之一三乙胺，體積百分含量)以12BV/h的流速洗脫并收集5-8BV洗脫液；將收集的洗脫液濃縮至干即得粗品；

步驟S3，堿開環酸閉環精制：將步驟S2所得粗品使用pH值為9.5的堿水溶解，過濾去除不溶物，濾液再用酸調節pH值至6.5，低溫析晶，過濾收集析出物，洗滌、干燥，用65％乙醇(含萬分之一三乙胺，體積百分含量)溶解作為上樣液；

步驟S4，DM130大孔吸附樹脂分離：以DM130大孔吸附樹脂為分離介質并裝柱，樹脂徑高比為1:20，拌樣樹脂占樹脂總量的1/20，濕法裝柱，拌樹脂上樣；用9BV的65％乙醇(含萬分之一三乙胺，體積百分含量)以4BV/h的流速洗脫并收集8-9BV洗脫液，8-9BV洗脫液濃縮干燥即得雷公藤內酯酮。

優選地，步驟S1提取的固液比為1:5，1kg干燥根對應用5L的乙醇溶液冷浸提取。

優選地，步驟S1用95％乙醇冷浸提取。

優選地，步驟S1回收提取液中的乙醇后用水稀釋至0.5g生藥/mL，過濾，收集濾液作為大孔樹脂上樣液。

優選地，步驟S2拌樣樹脂質量為上樣液對應生藥質量的1/2。