[發明專利]檢測多種氨基酸和酰基肉堿、甲基丙二酸的方法和試劑盒

在審

• 申請號: 201810117512.4
• 申請日: 2018-02-06
• 公開（公告）號: CN110118845A
• 公開（公告）日: 2019-08-13
• 發明（設計）人: 王巖;付潔;王艷;楊堯;王哲
• 申請（專利權）人: 北京金則醫學科技發展有限公司
• 主分類號: G01N30/34
• 分類號: G01N30/34;G01N30/06
• 代理公司: 北京英賽嘉華知識產權代理有限責任公司 11204
• 代理人: 王達佐;何可

1.串聯質譜法檢測用試劑盒，包含提取液和流動相，并任選地包含質控標準品、目標分析物的同位素標準品和衍生化試劑中的一種或多種，其中所述提取液為濃度為85-95體積％的甲醇水溶液，所述流動相為包含水、乙腈和五氟丙酸的混合物，其中水、乙腈和五氟丙酸的體積比為70-90:15-25:0.15-0.25。

2.如權利要求1所述的試劑盒，其中所述衍生化試劑為乙酰氯和正丁醇混合物，優選地，乙酰氯與正丁醇體積比為1:8.5-9.2。

3.如權利要求1或2所述的試劑盒，其中所述目標分析物選自氨基酸、酰基肉堿、甲基丙二酸、以及上述的任意組合。

4.用串聯質譜法檢測樣品中目標分析物的方法，包括以下步驟：

(a)用提取液稀釋所述目標分析物的同位素標準品，以制備提取工作液，其中所述提取液為濃度為85-95體積％的甲醇水溶液；

(b)用所述提取工作液處理所述樣品，并進行干燥；

(c)用衍生化試劑處理來自步驟(b)的提取處理后的樣品，并進行干燥；

(d)用流動相復溶來自步驟(c)的衍生化處理后的樣品，其中所述流動相為包含水、乙腈和五氟丙酸的混合物，其中水、乙腈和五氟丙酸的體積比為70-90:15-25:0.15-0.25；以及

(e)在串聯質譜儀檢測來自步驟(d)的復溶后的樣品。

5.如權利要求4所述的方法，其中所述衍生化試劑為乙酰氯和正丁醇混合物，優選地，乙酰氯與正丁醇體積比為1:8.5-9.2。

6.如權利要求4或5所述的方法，其中所述目標分析物選自氨基酸、酰基肉堿、甲基丙二酸、以及上述的任意組合。

7.如權利要求4-6中任一項所述的方法，還包括在步驟(b)-(e)中與所述樣品平行地處理和檢測質控標準品。

8.下述物質在制備用于遺傳代謝病診斷的串聯質譜法檢測用試劑盒中的用途：

提取液，所述提取液為濃度為85-95體積％的甲醇水溶液；

流動相，所述流動相為包含水、乙腈和五氟丙酸的混合物，其中水、乙腈和五氟丙酸的體積比為70-90:15-25:0.15-0.25；和

任選的質控標準品、目標分析物的同位素標準品和衍生化試劑中的一種或多種。

9.如權利要求8所述的用途，其中所述遺傳代謝病選自甲基丙二酸血癥、高苯丙氨酸血癥、高苯丙氨酸血癥、鳥胺酸氨甲酰基轉移酶缺乏癥、丙酸血癥、短鏈酰基輔酶A脫氫酶缺乏癥(SCAD)、瓜氨酸血癥、極長鏈酰基輔酶A脫氫酶缺乏癥(VLAD)、酪氨酸血癥、酮硫解酶缺乏癥、戊二酸血癥I型(GA-I)、異戊酸血癥和高甲硫氨酸血癥。

10.如權利要求8或9所述的用途，其中所述衍生化試劑為乙酰氯和正丁醇混合物，優選地，體積比為1：9；和/或

其中所述目標分析物選自氨基酸、酰基肉堿、甲基丙二酸、以及上述的任意組合。