[發明專利]一種含油污泥中石油烴類的降解菌株JN3及其應用

有效

• 申請號: 201810115877.3
• 申請日: 2018-02-06
• 公開（公告）號: CN108048376B
• 公開（公告）日: 2020-08-04
• 發明（設計）人: 葉正芳;姜楠;趙泉林
• 申請（專利權）人: 北京大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C02F11/02;C02F101/32;C12R1/38
• 代理公司: 北京智繪未來專利代理事務所(普通合伙) 11689
• 代理人: 郭紅燕

1.一種含油污泥降解修復的菌株JN3，其特征在于，所述菌株為假單胞菌屬Pseudomonas sp.，保藏單位名稱為中國普通微生物菌種保藏管理中心，保藏號為CGMCCNO.14974。

2.根據權利要求1所述的一種含油污泥降解修復的菌株JN3的應用，其特征在于：所述菌株JN3以石油烴類降解的方式進行含油污泥的降解修復。

3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于：所述菌株JN3對石油烴類的降解條件為20-45℃、pH值7-11。

4.根據權利要求2所述的應用，其特征在于：所述菌株JN3以單一菌株對C₂₀的長鏈烷烴具有明顯的降解能力，且對霍烷C₂₉H₅₀的降解能力較強，達到100％。

5.根據權利要求2所述的應用，其特征是，包括如下步驟：

(1)挑取Pseudomonas sp.JN3單菌落于滅菌的LB液體培養基的錐形瓶中，用透氣封口膜封口，將錐形瓶置于搖床中于120rpm、30℃，活化24h制成種子培養液；

(2)將上述培養的種子液按5％的接種量接種于含LB培養基發酵罐進行培養，采用空氣壓縮機進行曝氣，攪拌轉速為200r/min，培養至對數生長期；

(3)將遼河油田含油污泥，風干研磨、過1mm篩后，按照10％的接種量加入OD600＝1的Pseudomonas sp.JN3活化的菌液，并用無機鹽培養基調節液土比為2:5，用透氣封口膜封口；

(4)將添加了菌液和無機鹽培養基的含油污泥放置于恒溫培養箱中靜置培養，為達到最佳的降解效果，調節土壤的pH值為7，并維持溫度在25℃。

6.根據權利要求5所述的應用，其特征是：所述的LB培養基的組分為：胰蛋白胨10g、酵母提取物5g、NaCl 10g、蒸餾水1000mL，調節pH為7。

7.根據權利要求5所述的應用，其特征是：所述的無機鹽培養基的組分為：NaCl 30g，NH₄NO₃ 3g，KH₂PO₄ 1g，K₂HPO₄ 1g，CaCl₂ 0.02g，MgSO₄ 0.5g，瓊脂粉20g，去離子水1L，微量元素溶液10ml；所述微量元素溶液的組分為：CuSO₄ 0.05g，MnSO₄ 0.05g，FeSO₄·7H₂O 0.05g，去離子水50ml。