[發(fā)明專利]一種含油污泥中石油烴類的降解菌株JN4及其應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810115860.8
• 申請日: 2018-02-06
• 公開（公告）號: CN108048374B
• 公開（公告）日: 2020-08-04
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 葉正芳;姜楠;趙泉林
• 申請（專利權(quán)）人: 北京大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C02F11/02;C02F101/32;C12R1/38
• 代理公司: 北京智繪未來專利代理事務所(普通合伙) 11689
• 代理人: 郭紅燕

1.一種含油污泥降解修復的菌株JN4，其特征在于，所述菌株為施氏假單胞菌（Pseudomonas stutzeri） ，保藏單位名稱為中國普通微生物菌種保藏管理中心，保藏號為CGMCC NO.14975。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種含油污泥降解修復的菌株JN4的應用，其特征在于：所述菌株JN4以石油烴類降解的方式進行含油污泥的降解修復。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應用，其特征在于：所述菌株JN4對石油烴類的降解條件為25-40℃、pH值5-11。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應用，其特征在于：所述菌株JN4以單一菌株對n-C₁₀～n-C₃₀具有明顯的降解能力，通過GC-MS分析表明，該菌株對芳香烴萘烷、茚烷、高雄烴的降解能力較強，達到100％。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應用，其特征是，包括如下步驟：

(1)挑取Pseudomonas stutzeri JN4單菌落于滅菌的LB液體培養(yǎng)基的錐形瓶中，用透氣封口膜封口，將錐形瓶置于搖床中于120rpm、30℃，活化24h制成種子培養(yǎng)液；

(2)將上述培養(yǎng)的種子液按5％的接種量接種于含LB培養(yǎng)基發(fā)酵罐進行培養(yǎng)，采用空氣壓縮機進行曝氣，攪拌轉(zhuǎn)速為200r/min，培養(yǎng)至對數(shù)生長期；

(3)將遼河油田含油污泥，風干研磨、過1mm篩后，按照10％的接種量加入OD600＝1的Pseudomonas stutzeri JN4活化的菌液，并用無機鹽培養(yǎng)基調(diào)節(jié)液土比為2:5，用透氣封口膜封口；

(4)將添加了菌液和無機鹽培養(yǎng)基的含油污泥放置于恒溫培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)，為達到最佳的降解效果，調(diào)節(jié)土壤的pH值為7，并維持溫度在35℃。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應用，其特征是：所述的LB培養(yǎng)基的組分為：胰蛋白胨10g、酵母提取物5g、NaCl 10g、蒸餾水1000mL，調(diào)節(jié)pH為7。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應用，其特征是：所述的無機鹽培養(yǎng)基的組分為：NaCl 30g，NH₄NO₃ 3g，KH₂PO₄ 1g，K₂HPO₄ 1g，CaCl₂ 0.02g，MgSO₄ 0.5g，瓊脂粉20g，去離子水1L，微量元素溶液10ml；所述微量元素溶液的組分為：CuSO₄ 0.05g，MnSO₄ 0.05g，F(xiàn)eSO₄·7H₂O 0.05g，去離子水50ml。