[發(fā)明專利]一種實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)RCL的試劑和方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810114113.2
• 申請(qǐng)日: 2018-02-05
• 公開（公告）號(hào): CN110117675B
• 公開（公告）日: 2022-03-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉芳;蘭麗平;魏雨恬;葉迅;張麗;黃家琪;姚意弘
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 西比曼生物科技（香港）有限公司
• 主分類號(hào): C12Q1/70
• 分類號(hào): C12Q1/70;C12R1/93
• 代理公司: 北京市中咨律師事務(wù)所 11247
• 代理人: 黃革生

1.一種試劑組，其特征在于，所述的試劑組包括：

(i) 特異性擴(kuò)增VSV-G基因的第一引物對(duì)和第一探針，

其中，所述的第一引物對(duì)包括：

第一上游引物：5’-GAAAGGGAACTGTGGGATGACT-3’，序列如SEQ ID NO: 1所示，和

第一下游引物：5’-GAACTGGTCCTCAGAACTCCATT-3’，序列如SEQ ID NO: 2所示；

并且，所述的第一探針為：

5’-6-FAM-CATATGAAGACGTGGAAATTGGACCC-MGB-3’，序列如SEQ ID NO: 3所示；和/或

(ii) 特異性擴(kuò)增VSV-G基因的第二引物對(duì)和第二探針，

其中，所述的第二引物對(duì)包括：

第二上游引物：5’-GGATGTGTCATGCTTCCAAATGG-3’，序列如SEQ ID NO: 4所示，和

第二下游引物：5’-GTGAAGGATCGGATGGAATGTGTTA-3’，序列如SEQ ID NO: 5所示；

并且，所述的第二探針為：

5’-6-FAM-ACCAGCGGAAATCACAAGTAGTG-MGB-3’，序列如SEQ ID NO: 6所示；

所述試劑組用于檢測(cè)具有復(fù)制能力的慢病毒RCL，并且所述的慢病毒以皰疹性口腔炎病毒G蛋白(VSV-G)為包膜蛋白。

2.如權(quán)利要求1所述的試劑組，其特征在于，所述的試劑組還包含：

(iii)特異性擴(kuò)增內(nèi)參基因的第三引物對(duì)和第三探針，

其中，所述的第三引物對(duì)包括：

第三上游引物：序列如SEQ ID NO: 27所示，和

第三下游引物：序列如SEQ ID NO: 28所示；

并且，所述的第三探針序列如SEQ ID NO: 29所示。

3.如權(quán)利要求1所述的試劑組，其特征在于，所述的試劑組還包含：

(iii)特異性擴(kuò)增內(nèi)參基因的第三引物對(duì)和第三探針，

其中，所述的第三引物對(duì)包括：

第三上游引物：序列如SEQ ID NO: 25所示，和

第三下游引物：序列如SEQ ID NO: 26所示；

并且，所述的第三探針序列如SEQ ID NO: 27所示。

4.如權(quán)利要求1所述的試劑組，其特征在于，所述試劑組包括所述的(i) 特異性擴(kuò)增VSV-G基因的第一引物對(duì)和第一探針；和所述的(ii) 特異性擴(kuò)增VSV-G基因的第二引物對(duì)和第二探針。

5.如權(quán)利要求2所述的試劑組，其特征在于，所述試劑組包括所述的(i) 特異性擴(kuò)增VSV-G基因的第一引物對(duì)和第一探針；所述(ii) 特異性擴(kuò)增VSV-G基因的第二引物對(duì)和第二探針，和所述的(iii) 特異性擴(kuò)增內(nèi)參基因的第三引物對(duì)和第三探針。

6.如權(quán)利要求1所述的試劑組，其特征在于，所述試劑組檢測(cè)RCL的擴(kuò)增效率≥90%。

7.如權(quán)利要求1所述的試劑組，其特征在于，所述試劑組檢測(cè)RCL的擴(kuò)增效率≥92%。

8.如權(quán)利要求1所述的試劑組，其特征在于，所述試劑組檢測(cè)RCL的擴(kuò)增效率≥95%。

9.一種PCR擴(kuò)增體系，其特征在于，所述的擴(kuò)增體系包括：用于擴(kuò)增的緩沖體系以及位于所述體系中的權(quán)利要求1所述的試劑組。

10.一種檢測(cè)試劑，其特征在于，所述的檢測(cè)試劑中含有權(quán)利要求1所述的試劑組。

11.一種檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述的檢測(cè)試劑盒中包含一個(gè)或多個(gè)容器，和位于所述容器中的如權(quán)利要求1所述的試劑組。