[發明專利]一種利用菜籽粕固態發酵制備環脂肽的方法

在審

• 申請號: 201810109528.0
• 申請日: 2018-02-05
• 公開（公告）號: CN108330152A
• 公開（公告）日: 2018-07-27
• 發明（設計）人: 何榮海;代春華;任曉鋒;湯穎秀;馬海樂
• 申請（專利權）人: 江蘇大學
• 主分類號: C12P21/04
• 分類號: C12P21/04;C12N1/20;C12R1/07
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種利用菜籽粕固態發酵制備環脂肽的方法，按照下述步驟進行：

(1)將甲基營養型芽胞桿菌(Bacillus methylotrophicus)用種子培養基進行擴大培養，種子培養基的組成：蛋白胨5.0g，牛肉浸取物3.0g，NaCl 5.0g，瓊脂15.0g，蒸餾水1.0L，pH 7.0；按照體積比為2～5％的比例接種活化后的甲基營養型芽胞桿菌(Bacillusmethylotrophicus)，在25～32℃及180rpm條件下培養10小時；

(2)甲基營養型芽胞桿菌(Bacillus methylotrophicus)固態發酵菜籽粕：菜籽粕5～25g，分別加入占菜籽粕質量比為5～15％的廢糖蜜及10％的無機鹽溶液，然后加入與菜籽粕質量體積比為1:1的水；按照菜籽粕質量體積比為2～10％(v/w)的比例接入步驟(1)中擴大培養后的種子液，于25～32℃發酵24～48h；

(3)發酵結束后，添加菜籽粕質量的5～15倍的去離子水浸泡半小時，并逐步添加6mol/L氫氧化鈉，將浸提液pH調節至8.0，離心除去菌體，收集上清液；在上清液中緩慢加入6mol/L鹽酸，調節pH至2.0，靜置30min后離心，收集沉淀；沉淀用0.1mol/L NaNO₃洗滌3次，再用去離子水洗滌3次，離心收集沉淀；冷凍干燥，制得環脂肽成品。

2.根據權利要求1所述的一種利用菜籽粕固態發酵制備環脂肽的方法，其特征在于：所用發酵方式為固態發酵，廢糖蜜添加量為菜籽粕質量的5～15％。