[發(fā)明專利]一種高產(chǎn)胞外多糖舊金山乳桿菌Ls-1001菌株培養(yǎng)方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810106029.6
• 申請日: 2018-02-02
• 公開（公告）號: CN108102974B
• 公開（公告）日: 2021-07-27
• 發(fā)明（設計）人: 張國華;張緯珍;劉俊峰;孫瑜嶸;何國慶
• 申請（專利權(quán)）人: 山西大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/38;C12R1/225
• 代理公司: 太原市科瑞達專利代理有限公司 14101
• 代理人: 申艷玲

本發(fā)明公開了一種高產(chǎn)胞外多糖舊金山乳桿菌Ls?1001菌株培養(yǎng)方法，包括以下步驟：將凍藏的舊金山乳桿菌斜面菌種用滅過菌的生理鹽水進行稀釋，直至測得在600nm處的吸光度值A(chǔ)=0.5為止，然后按體積分數(shù)為2%接種到100mL添加有生長促進因子的液體培養(yǎng)基中進行厭氧培養(yǎng)，培養(yǎng)基pH為5.0?5.4，培養(yǎng)溫度是30?32℃，培養(yǎng)34?36小時。本發(fā)明使舊金山乳桿菌Ls?1001的菌種產(chǎn)量、胞外多糖產(chǎn)量與之前相比分別提高了4.6倍、1.4倍，培養(yǎng)時間縮短了10?12h，具有明顯的增產(chǎn)效果，也為今后工業(yè)化生產(chǎn)奠定了基礎(chǔ)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種高產(chǎn)胞外多糖舊金山乳桿菌Ls-1001菌株培養(yǎng)方法，屬于食品微生物

領(lǐng)域。

背景技術(shù)

酸面團，在我國一般被稱為“老面”、“酵子”、“面肥”等，具有悠久的使用歷史。上世紀80 年代，即發(fā)活性干酵母被引入我國，因其使用便捷，傳統(tǒng)面食發(fā)酵劑逐漸被取代，但直到現(xiàn)在仍有很多地區(qū)尤其農(nóng)村地區(qū)，仍然使用其制備饅頭等主食，因使用傳統(tǒng)面食發(fā)酵劑制備的饅頭品質(zhì)更優(yōu)。究其原因，是其中復雜的微生物體系使得發(fā)酵的饅頭風味香氣最佳，對感官品質(zhì)有較好的影響。而舊金山乳桿菌的應用對發(fā)酵面制品的風味、色澤、保存期等具有良好的效果。

舊金山乳桿菌（Lactobacillus sanfranciscensis），一種專性異型發(fā)酵乳酸菌，是面制品發(fā)酵過程中重要的乳酸菌，在酸面團的發(fā)酵過程中起著重要的作用。舊金山乳桿菌可水解麥芽糖釋放葡萄糖。此外，舊金山乳桿菌產(chǎn)生的胞外多糖（EPS）對改善面包的比容、結(jié)構(gòu)品質(zhì)、硬度、穩(wěn)定性和保存期限均有很好的作用。據(jù)文獻報道，乳酸菌產(chǎn)生的胞外多糖還具有抗腫瘤作用。Antonio Alfonzo等人的研究表明從面粉中分離出的舊金山乳桿菌菌株表現(xiàn)出抗李斯特菌活性。

目前，以活性干酵母為發(fā)酵劑蒸制的饅頭口感單一、風味略顯不足，而舊金山乳桿菌的添加能使面包具有更好的風味和質(zhì)地，且效果顯著。因此，該菌具有良好的研究價值和發(fā)展前景。但目前針對舊金山乳桿菌菌種的工業(yè)化生產(chǎn)尚未成熟，究其原因主要是對菌種的特性和培養(yǎng)條件尚未清晰認識。本實驗以實驗室保藏菌株高產(chǎn)胞外多糖的舊金山乳桿菌Ls-1001，對其培養(yǎng)條件進行了研究，獲得了舊金山乳桿菌Ls-1001的培養(yǎng)方法，為舊金山菌種的工業(yè)化生產(chǎn)提供理論參考依據(jù)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明旨在提供一種高產(chǎn)胞外多糖舊金山乳桿菌Ls-1001菌株培養(yǎng)方法，以實驗室保藏菌株高產(chǎn)胞外多糖的舊金山乳桿菌Ls-1001，對其培養(yǎng)條件進行了研究，獲得了舊金山乳桿菌Ls-1001的培養(yǎng)方法，為舊金山菌種的工業(yè)化生產(chǎn)提供理論參考依據(jù)；該方法能夠有效提高菌種產(chǎn)量。

本發(fā)明采用的菌株為舊金山乳桿菌，其菌株為舊金山乳桿菌Ls-1001，保藏單位：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所，保藏日期：2017年6月12日，保藏編號：CGMCC No.14232，分類命名：舊金山乳桿菌Lactobacillus sanfrancisco。

本發(fā)明提供了一種高產(chǎn)胞外多糖舊金山乳桿菌Ls-1001菌株培養(yǎng)方法，包括以下步驟：

舊金山乳桿菌Ls-1001的富集培養(yǎng)：將凍藏的斜面菌種用滅過菌的生理鹽水進行稀釋，直至測得在600nm處的吸光度值A(chǔ)=0.5為止，然后按體積分數(shù)為2%接種到100mL添加有生長促進因子的液體培養(yǎng)基中進行厭氧培養(yǎng)，培養(yǎng)基pH為5.0-5.4，培養(yǎng)溫度為30-32℃，培養(yǎng)時間為34-36h。

上述培養(yǎng)方法中，舊金山乳桿菌為保藏編號：CGMCC No.14232的舊金山乳桿菌菌株。

上述培養(yǎng)方法中，所述的液體培養(yǎng)基mMRS培養(yǎng)基。培養(yǎng)基的組成成分為：