[發明專利]犬重組干擾素-α6及其制備方法與應用

在審

• 申請號: 201810102803.6
• 申請日: 2018-02-01
• 公開（公告）號: CN108484748A
• 公開（公告）日: 2018-09-04
• 發明（設計）人: 賈紅;鑫婷;郭曉宇;侯紹華;朱鴻飛;姜一曈;宋天琪
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院北京畜牧獸醫研究所
• 主分類號: C07K14/56
• 分類號: C07K14/56;C12N15/20;C12N15/81;C12N1/19;A61K38/21;A61P31/14;A61P31/20;C12R1/84
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君;陳征

1.一種犬重組干擾素-α6，其特征在于，其氨基酸序列為：

a)SEQ ID No.2所示的氨基酸序列；或

b)SEQ ID No.2所示的氨基酸序列經替換、缺失和/或添加一個或幾個氨基酸殘基形成的具有同等功能的氨基酸序列。

2.編碼權利要求1所述犬重組干擾素-α6的基因，其特征在于，是如下a)或b)：

a)其核苷酸序列如序列表中SEQ ID No.1所示；或

b)由SEQ ID No.1所示核苷酸序列經取代一個或幾個核苷酸，得到編碼犬重組干擾素-α6的核苷酸序列。

3.含有權利要求2所述基因的重組表達載體。

4.含有權利要求2所述基因或權利要求3所述重組表達載體的宿主細胞。

5.如權利要求4所述的宿主細胞，其為畢赤酵母細胞。

6.權利要求2所述的基因或權利要求3所述重組表達載體或權利要求4所述的宿主細胞在制備廣譜抗病毒藥物中的應用。

7.權利要求2所述的基因或權利要求3所述重組表達載體或權利要求4所述的宿主細胞在制備廣譜抗病毒制劑中的應用。

8.如權利要求6或7所述的應用，其特征在于，所述病毒為犬瘟熱病毒、犬細小病毒、犬副流感病毒、犬傳染性肝炎病毒、水泡性口炎病毒。

9.含有權利要求2所述基因或其編碼蛋白的生物制劑或藥物。

10.一種制備犬重組干擾素-α6的方法，其特征在于，將密碼子優化后的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的犬干擾素-α6基因定向克隆至質粒中構建重組質粒，重組質粒轉化至畢赤酵母感受態細胞，制備重組菌，通過確定甲醇誘導條件、誘導濃度、誘導時間，蛋白收獲時間等優化酵母的發酵、表達，采用超濾濃縮后ChelatingSFF-Ni親和層析的方法進行純化，有效提高了產物的產量，從而獲得高產量、高純度的犬重組干擾素-α6。