[發(fā)明專利]細(xì)黃鏈霉菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基、制備方法及其發(fā)酵方法、發(fā)酵產(chǎn)物、生防產(chǎn)品和應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810102697.1
• 申請(qǐng)日: 2018-02-01
• 公開（公告）號(hào): CN108277177B
• 公開（公告）日: 2021-09-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉峰;王江偉;潘明;王傳磊;王珍偉;張魯新;王培;朱洪菊
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山東五福生生態(tài)工程有限公司
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;A01N63/28;A01P1/00;C12R1/465
• 代理公司: 北京超凡志成知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11371
• 代理人: 錢學(xué)宇

1.一種細(xì)黃鏈霉菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基，其特征在于，所述細(xì)黃鏈霉菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基由以下重量份的組分組成：麩皮40-50份、稻殼15-25份、米糠25-35份、碳酸鈣3-7份和水；

所述細(xì)黃鏈霉菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基的含水率為45-55％。

2.按照權(quán)利要求1所述的細(xì)黃鏈霉菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基，其特征在于，所述細(xì)黃鏈霉菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基由以下重量份的組分組成：麩皮42-48份、稻殼18-23份、米糠28-32份、碳酸鈣3-6份和水。

3.按照權(quán)利要求1所述的細(xì)黃鏈霉菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基，其特征在于，所述細(xì)黃鏈霉菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基由以下重量份的組分組成：麩皮44-46份、稻殼19-21份、米糠29-31份、碳酸鈣4-5份和水。

4.一種權(quán)利要求1所述的細(xì)黃鏈霉菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

將配方量的麩皮、稻殼、米糠、碳酸鈣和水混合均勻，經(jīng)滅菌處理，得到細(xì)黃鏈霉菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基；

滅菌溫度為110-130℃，滅菌時(shí)間為30-60min。

5.按照權(quán)利要求4所述的細(xì)黃鏈霉菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于，滅菌溫度為121℃，滅菌時(shí)間為40min。

6.一種細(xì)黃鏈霉菌的發(fā)酵方法，其特征在于，包括以下步驟：

將細(xì)黃鏈霉菌菌株經(jīng)種子活化和液體種子培養(yǎng)后，采用權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的細(xì)黃鏈霉菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基或權(quán)利要求4或5所述的細(xì)黃鏈霉菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基的制備方法制備得到的細(xì)黃鏈霉菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，得到發(fā)酵產(chǎn)物。

7.按照權(quán)利要求6所述的細(xì)黃鏈霉菌的發(fā)酵方法，其特征在于，包括以下步驟：

(a)斜面種子活化：將細(xì)黃鏈霉菌菌株在無菌條件下接種于斜面培養(yǎng)基上，得到斜面種子；

(b)液體種子培養(yǎng)：將步驟(a)得到的斜面種子接種于液體培養(yǎng)基中，得到液體種子；

(c)發(fā)酵培養(yǎng)：將步驟(b)得到的液體種子接種于所述細(xì)黃鏈霉菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基中，得到發(fā)酵產(chǎn)物；

(d)將步驟(c)得到的發(fā)酵產(chǎn)物干燥后，得到干燥的發(fā)酵產(chǎn)物。

8.按照權(quán)利要求7所述的細(xì)黃鏈霉菌的發(fā)酵方法，其特征在于，步驟(c)中液體種子的接種量為15-25％(v/w)；

步驟(c)中培養(yǎng)溫度28-30℃，培養(yǎng)時(shí)間120-168h；

步驟(a)中培養(yǎng)溫度28-30℃，培養(yǎng)時(shí)間96-120h；

步驟(b)中斜面種子用無菌水洗脫，接種于液體培養(yǎng)基中，接種量為5-10％(v/v)；

步驟(b)中培養(yǎng)溫度28-30℃，培養(yǎng)時(shí)間30-48h。

9.按照權(quán)利要求7或8所述的細(xì)黃鏈霉菌的發(fā)酵方法，其特征在于，步驟(a)中斜面培養(yǎng)基由8-12g/L的可溶性淀粉、8-12g/L的葡萄糖、2-5g/L的酵母粉、0.5-1g/L的磷酸氫二鉀、0.5-1g/L的硫酸鎂和15-25g/L的瓊脂組成，pH值為7.0-7.5；

步驟(b)中液體培養(yǎng)基由8-12g/L的蛋白胨、8-12g/L的酵母浸粉、15-25g/L的葡萄糖和5-10g/L的碳酸鈣組成，pH值為7.0-7.5；

斜面培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基均獨(dú)立地在使用前進(jìn)行滅菌處理，滅菌溫度為110-130℃，滅菌時(shí)間為20-30min，

步驟(d)中發(fā)酵產(chǎn)物在40-50℃下干燥至含水率小于10％。

10.按照權(quán)利要求9所述的細(xì)黃鏈霉菌的發(fā)酵方法，其特征在于，斜面培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基均獨(dú)立地在使用前進(jìn)行滅菌處理，滅菌溫度為121℃，滅菌時(shí)間為25min。

11.按照權(quán)利要求7或8所述的細(xì)黃鏈霉菌的發(fā)酵方法，其特征在于，包括以下步驟：

(a)斜面種子活化：將細(xì)黃鏈霉菌菌株在無菌條件下接種于無菌斜面培養(yǎng)基上，培養(yǎng)溫度28-30℃，培養(yǎng)時(shí)間96-120h，得到斜面種子；

所述斜面培養(yǎng)基由8-12g/L的可溶性淀粉、8-12g/L的葡萄糖、2-5g/L的酵母粉、0.5-1g/L的磷酸氫二鉀、0.5-1g/L的硫酸鎂和15-25g/L的瓊脂組成，pH值為7.0-7.5；

(b)液體種子培養(yǎng)：將步驟(a)得到的斜面種子用無菌水洗脫，以5-10％(v/v)的接種量接種于無菌液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)溫度28-30℃，培養(yǎng)時(shí)間30-48h，得到液體種子；

所述液體培養(yǎng)基由8-12g/L的蛋白胨、8-12g/L的酵母浸粉、15-25g/L的葡萄糖和5-10g/L的碳酸鈣組成，pH值為7.0-7.5；

(c)固體發(fā)酵培養(yǎng)：將步驟(b)得到的液體種子以15-25％(v/w)的接種量接種于無菌細(xì)黃鏈霉菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基中，混合均勻，培養(yǎng)溫度28-30℃，培養(yǎng)時(shí)間120-168h，得到發(fā)酵產(chǎn)物；

所述細(xì)黃鏈霉菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基由40-50重量份的麩皮、15-25重量份的稻殼、25-35重量份的米糠、3-7重量份的碳酸鈣和水組成，含水率45-55％；

(d)將步驟(c)得到的發(fā)酵產(chǎn)物于40-50℃下干燥，期間取樣測定水分，當(dāng)含水率低于10％時(shí)，干燥結(jié)束，粉碎后得到干燥的發(fā)酵產(chǎn)物。