[發明專利]一種重金屬離子的定量檢測方法

在審

• 申請號: 201810102280.5
• 申請日: 2018-02-01
• 公開（公告）號: CN108387537A
• 公開（公告）日: 2018-08-10
• 發明（設計）人: 魯學文;曾令文;梅婷;方志遠
• 申請（專利權）人: 中國科學院廣州生物醫藥與健康研究院
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31;G01N21/78;G01N33/543
• 代理公司: 廣州科粵專利商標代理有限公司 44001
• 代理人: 郝文婷

1.一種重金屬離子的定量檢測方法，其特征在于，包括如下步驟：

在待測樣品中加入0.1-50μL、10mM的標記有一段特定核酸序列的螯合劑，用于螯合重金屬離子，利用每孔包被有0.01～5μg重金屬離子抗體的酶標板富集螯合產物，清洗去除游離核酸后，加入擴增和顯色溶液并孵育，反應終止后檢測吸光值，計算待測樣品中的重金屬離子濃度；其中，所述特定核酸序列的長度為20～100nt，且其3’端有一段4～10nt的隨機核酸序列引物，所述引物緊連有一個切刻酶位點，其余區段為富C序列。

2.根據權利要求1所述的重金屬離子的定量檢測方法，其特征在于，所述螯合劑為EDTA、EGTA或PEI。

3.根據權利要求1所述的重金屬離子的定量檢測方法，其特征在于，通過將所述重金屬離子抗體偶聯于顆粒物載體上，以代替將重金屬離子抗體包被的酶標板。

4.根據權利要求33所述的重金屬離子的定量檢測方法，其特征在于，所述顆粒物載體的粒徑為0.1～1μm，其為磁珠、PS微球或氧化硅微球。

5.根據權利要求4所述的重金屬離子的定量檢測方法，其特征在于，所述顆粒物載體的外層修飾有氨基、羧基、羥基或環氧基。

6.根據權利要求1所述的重金屬離子的定量檢測方法，其特征在于，所述擴增和顯色溶液用于在30～40℃下，擴增產生大量的單鏈富G核酸，并發生顯色反應。

7.根據權利要求1所述的重金屬離子的定量檢測方法，其特征在于，所述重金屬離子為鎘離子。