[發明專利]一種豬屬動物冷凍精液稀釋液及其配制方法

在審

• 申請號: 201810093458.4
• 申請日: 2018-01-31
• 公開（公告）號: CN108669069A
• 公開（公告）日: 2018-10-19
• 發明（設計）人: 王英群;胡傳活;黃明光;劉蛟;李丹丹;吳柱月;李銘;潘天彪;李美珍;唐胤晟
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區畜禽品種改良站;廣西大學;廣西壯族自治區畜牧研究所
• 主分類號: A01N1/02
• 分類號: A01N1/02
• 代理公司: 桂林市持衡專利商標事務所有限公司 45107
• 代理人: 湯凌志

1.一種豬屬動物冷凍精液稀釋液的配制方法，其特征在于：采用兩步稀釋法，預先使用Ⅰ液孵育半小時后，加入Ⅱ液后分裝進行冷凍程序，得到；

所述的精子體積分數30-36％、稀釋液Ⅰ液的體積分數為30-36％、稀釋液Ⅱ液的體積分數為30-36％；

所述稀釋液Ⅰ液由以下體積分數的組分制成：TCG基礎液74-84％、卵黃液15-25％、PTD-FNK 0.2-1％；

所述稀釋液Ⅱ液由以下體積分數的組分制成：TCG基礎液91％，甘油9％；

所述的PTD-FNK，是一種抗凋亡蛋白PTD-FNK蛋白，該蛋白質為抗凋亡蛋白Bcl-xL的突變體并添加膜穿梭序列PTD，其分子量為36kDa，其序列為：

TATGGCAGGAAGAAGCGGAGACAGCGACGAAGAATGTCTCAGAGCAACCGGGAGCTGGTGGTTGACTTTCTCTCCTACAAGCTCTCCCAGAAAGGATTCAGCTGGAGTAATTTTAGCGATGTCGAAGAGAACAGGACTGAAGCCCCAGAAGAAACTGAACCAGAAAGGGAGACCCCCAGTGCCATCAATGGCAACCCATCCTGGCACCTGGCGGATAGCCCCGCGGTGAATGGAGCCACTGGCCACAGCAGCAGTTTGGATGCGCGGGAGGTAATCCCCATGGCAGCAGTGAAGCAAGCGCTGAGAGAGGCTGGCGATGAGTTTGAACTGCGGTACCGGAGAGCATTCAGTGATCTAACATCCCAGCTTCATATAACCCCAGGGACAGCATATCAGAGCTTTGAACAGGTAGTGAATGAACTCTTTCGGGATGGGGTAAACTGGGGTCGCATTGTGGCCTTCTTCTCCTTTGGCGGGGCACTGTGCGTGGAAAGCGTAGACAAGGAGATGCAGGTATTGGTGAGTAAGATTGCAAGTTGGATGGCCACCTACCTGAATGACCACCTAGAGCCTTGGATCCAGGAGAACGGCGGCTGGGACACTTTTGTGGATCTCTACGGGAACAATGCAGCAGCCGAGAGCCGGAAAGGCCAGGAGCGTTTCAACCGCTGGTTCCTGACGGGCATGACTGTGGCTGGTGTAGTTCTGCTGGGCTCACTCTTCAGTCGGAAG。

2.根據權利要求1所述的一種豬屬動物冷凍精液稀釋液的配制方法，其特征在于：所述的TCG基礎液，包括葡萄糖、檸檬酸、Tris、青霉素和鏈霉素，每100mlTCG基礎液：1.1g葡萄糖、1.48g檸檬酸、2.42g Tris、青霉素的量為1000單位/ml、鏈霉素的量為1000單位/ml，雙蒸水定容100ml，0.22μm濾器過濾，4℃保存。

3.根據權利要求1所述的一種豬屬動物冷凍精液稀釋液的配制方法，其特征在于：所述的稀釋液Ⅰ中的卵黃液，是取卵黃10000rpm離心15min，取上清得到。

4.權利要求1-3所述的一種豬屬動物冷凍精液稀釋液的配制方法得到的豬屬動物冷凍精液稀釋液。