[發(fā)明專利]促進WSSV感染的基因Cq-BAF及制備方法與應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810091338.0
• 申請日: 2018-01-30
• 公開（公告）號: CN108285481A
• 公開（公告）日: 2018-07-17
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉海鵬;劉靈珂;張秋霞;王克堅
• 申請（專利權(quán)）人: 廈門大學(xué)
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C12N15/12;C12N15/81;A23K20/153;A61K38/17;A61P31/20
• 代理公司: 廈門南強之路專利事務(wù)所(普通合伙) 35200
• 代理人: 馬應(yīng)森

促進WSSV感染的基因Cq?BAF及制備方法與應(yīng)用，所述紅螯螯蝦屏障自整合因子命名為Cq?BAF。構(gòu)建Cq?BAF重組表達載體；將所得的重組表達載體轉(zhuǎn)化宿主細胞，并對宿主細胞進行誘導(dǎo)表達，獲得表達產(chǎn)物；分離純化所得的表達產(chǎn)物，獲得重組蛋白，即rCq?BAF。Cq?BAF能結(jié)合WSSV，抑制其功能后WSSV的感染復(fù)制能力降低，說明其本身對WSSV的感染具有促進作用，因此針對Cq?BAF的功能鑒定在探究WSSV如何感染蝦類細胞中具有重要研究價值，作為抗病毒感染的靶點，為制備抗WSSV類新藥和動物抗病飼料添加劑奠定良好基礎(chǔ)。紅螯螯蝦屏障自整合因子在制備抗WSSV類新藥和動物抗病飼料添加劑中應(yīng)用。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及對蝦白斑綜合征病毒(White spot syndrome virus，WSSV)，尤其是涉及一種促進WSSV感染的基因Cq-BAF及制備方法與應(yīng)用。

背景技術(shù)

WSSV是對蝦的主要病毒性病原，還能夠感染螯蝦、蟹和龍蝦等，WSSV已成為水產(chǎn)甲殼動物養(yǎng)殖的主要障礙，對水產(chǎn)甲殼動物養(yǎng)殖業(yè)的經(jīng)濟造成極大的危害，迄今為止，依然缺乏有效的藥物治療或預(yù)防。

屏障自整合因子(Barrier to autointegrationfactor,BAF)是一種重要的高度保守的蛋白，具有多種功能，與保持細胞基因組的完整性有關(guān)。BAF首先被發(fā)現(xiàn)能夠防止莫洛尼氏鼠白血病病毒(MoMLV)的自動整合，因此被命名為屏障自整合因子^[1]。BAF能與雙鏈DNA以非特異性的方式結(jié)合，并且同源二聚化成交聯(lián)橋DNA，形成更高階的核蛋白復(fù)合物^[2,3]。BAF還與許多細胞蛋白相互作用，包括駐留在核膜中的LAP2/emerin/MAN1(LEM)蛋白、組蛋白、核纖層蛋白、轉(zhuǎn)錄因子和DNA損傷應(yīng)答蛋白(DDR)等^[4-8]。除此之外，BAF還被認(rèn)為是一種系膜蛋白，核膜(NE)被重新組裝時，在有絲分裂后期階段將染色質(zhì)DNA和LEM蛋白結(jié)合在一起^[9,10]。在與病毒相關(guān)的研究中，BAF首先被確定為與莫洛尼鼠白血病病毒前整合復(fù)合物(PIC)相關(guān)的細胞因子，并且能通過阻斷PICs中“自殺”性的自整合來促進病毒基因組整合到宿主染色體中^[1]。BAF也能作為Ⅰ型單純皰疹病毒(HSV-1)感染的表觀遺傳調(diào)節(jié)劑起作用，通過招募組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶SETD1A到病毒啟動子處來增強HSV-1自身的轉(zhuǎn)錄復(fù)制^[7]，此外，在表達不可磷酸化的BAF突變體的細胞中，HSV-1DNA復(fù)制和病毒蛋白表達能力均降低^[11]。

參考文獻：

1.Lee MS,Craigie R.A Previously Unidentified Host Protein ProtectsRetroviral DNA from Autointegration.Proceedings of the National Academy ofSciences of the United States of America.1998 95:1528.

2.Bradley CM,Ronning DR,Ghirlando R,Craigie R,Dyda F.Structural basisfor DNA bridging by barrier-to-autointegration factor.Nature structural&molecular biology.2005 12:935-6.

3.Skoko D,Li M,Huang Y,Mizuuchi M,Cai M,Bradley CM,et al.Barrier-to-autointegration factor(BAF)condenses DNA by looping.Proceedings of theNational Academy of Sciences of the United States of America.2009 106:16610-5.