[發明專利]一種基于穿膜肽的三元基因遞送系統及其應用

有效

• 申請號: 201810089681.1
• 申請日: 2018-01-30
• 公開（公告）號: CN108404136B
• 公開（公告）日: 2019-12-03
• 發明（設計）人: 馮亞凱;郝雪芳;李茜;郭錦棠;任相魁
• 申請（專利權）人: 天津大學
• 主分類號: A61K47/42
• 分類號: A61K47/42;A61K47/34;A61K47/64;A61K47/60;A61K47/59;A61K48/00
• 代理公司: 12201 天津市北洋有限責任專利代理事務所
• 代理人: 陸藝<國際申請>=<國際公布>=<進入國

1.一種基于穿膜肽的三元基因遞送系統的制備方法，其特征是包括如下步驟：

(1)按摩爾比為1：8-16的比例，將八氨基POSS和NHS-PEG-OPSS溶解于pH＝7.4的PBS緩沖溶液中，室溫反應2-3小時；

所述八氨基POSS為八氨基籠狀聚倍半硅氧烷的簡稱；所述NHS-PEG-OPSS為鄰二硫吡啶聚乙二醇活性酯的簡稱；

(2)將REDV-G-TAT-G-NLS-C加入到步驟(1)獲得的溶液中，反應4-8小時，采用截留分子量為3500的透析袋透析提純，凍干，得到POSS-(PEG-NLS-G-TAT-G-REDV)₈聚合物；

所述八氨基POSS和REDV-G-TAT-G-NLS-C的摩爾比為1:8-16；

所述REDV-G-TAT-G-NLS-C的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；

(3)以pH＝7.4的PBS緩沖溶液為溶劑，配制濃度為0.5-2毫克/毫升的POSS-(PEG-NLS-G-TAT-G-REDV)₈聚合物液體；按POSS-(PEG-NLS-G-TAT-G-REDV)₈聚合物與ZNF580基因或Cy5標記的寡核苷酸的質量比為1：0.6-0.8的比例，將濃度為0.05-0.2毫克/毫升的ZNF580基因水溶液，或濃度為0.05-0.2毫克/毫升的Cy5標記的寡核苷酸水溶液，在攪拌下，滴加到所述聚合物液體中，攪拌1-2小時,得到二元基因遞送系統；

(4)將TP-H12多肽溶解于pH＝7.4的PBS緩沖溶液中，配成0.2-0.6毫克/毫升，在攪拌下，滴加到所述二元基因遞送系統中，得到基于穿膜肽的三元基因遞送系統；

所述二元基因遞送系統中ZNF580基因或Cy5標記的寡核苷酸與TP-H12的質量比為1:3-5；

所述TP-H12多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

2.權利要求1的方法制備的基于穿膜肽的三元基因遞送系統。

3.權利要求2的基于穿膜肽的三元基因遞送系統在制備基因遞送藥物中的應用。