[發(fā)明專利]一種適用于高海拔低溫環(huán)境的耐砷菌株及基于該菌株制備微生態(tài)制劑的發(fā)酵方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810086456.2
• 申請(qǐng)日: 2018-01-30
• 公開（公告）號(hào): CN108330084B
• 公開（公告）日: 2021-01-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周海燕;田云;肖紅仕;林元山;潘虎;白軍平;達(dá)娃;次頓;王翀;管桂萍;周輝;劉虎虎;盧向陽
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué);西藏自治區(qū)農(nóng)牧科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測研究所
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;C05F11/08;C05G3/80;C09K17/14;B09C1/10;C12R1/01
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1.一種能夠適用于低溫環(huán)境的耐砷菌株，其特征在于，所述耐砷菌株已在中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心保藏，保藏號(hào)為CGMCC No.14767，命名為短芽孢桿菌(Brevibacillus sp.)1-5菌株。

2.基于權(quán)利要求1所述耐砷菌株制備微生態(tài)菌劑的固體發(fā)酵方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟：

(1)將麥麩、草炭、硅藻土按質(zhì)量比5—9:1.5—2.5:1混和均勻，得混合物，向混合物中加入質(zhì)量為混合物質(zhì)量1—1.5倍的蒸餾水，調(diào)節(jié)pH至7，高溫滅菌，得混合培養(yǎng)基；

(2)挑取耐砷菌株接種到LB液體培養(yǎng)基中，于28℃下震蕩培養(yǎng)，培養(yǎng)至菌液OD₆₀₀值為0.3—0.7時(shí)取培養(yǎng)液，將培養(yǎng)液與LB液體培養(yǎng)基按體積比1:18至1:22的比例混勻，于37℃下震蕩培養(yǎng)20—28h，獲得種子菌液；

(3)將種子菌液按10％的接種量接種到混合培養(yǎng)基中，于25—37℃下培養(yǎng)45—50h，至復(fù)合物中的活菌數(shù)達(dá)到4.0×10¹⁰cfu/g，得達(dá)到活菌數(shù)要求的菌劑，將菌劑干燥至含水量≤5％，即得耐砷菌微生態(tài)菌劑。

3.基于權(quán)利要求1所述耐砷菌株制備微生態(tài)制劑的液體發(fā)酵方法，其特征在于，所述方法是將耐砷菌株接種至液體培養(yǎng)基，于37℃、轉(zhuǎn)速180rpm條件下發(fā)酵培養(yǎng)20—28h，得發(fā)酵液，即為耐砷菌微生態(tài)菌劑；或者，將發(fā)酵液進(jìn)行干燥后得干燥物，即為耐砷菌微生態(tài)菌劑；所述液體培養(yǎng)基基配方為：LB肉湯20—30g/L，七水硫酸亞鐵40—50g/L，硫酸銨2—5g/L，硫酸氫二鉀0.3—0.7g/L，七水硫酸鎂0.3—0.7g/L，氯化鉀0.08—0.12g/L，硝酸鈣0.008—0.012g/L，自然pH。

4.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述液體培養(yǎng)基基配方為：LB肉湯25g/L，七水硫酸亞鐵45g/L，硫酸銨3g/L，硫酸氫二鉀0.5g/L，七水硫酸鎂0.5g/L，氯化鉀0.1g/L，硝酸鈣0.01g/L，自然pH。