[發明專利]利用化學觸發劑提升FK506產量的方法有效
| 申請號: | 201810085143.5 | 申請日: | 2018-01-29 |
| 公開(公告)號: | CN108220359B | 公開(公告)日: | 2021-12-21 |
| 發明(設計)人: | 聞建平;王成;崔佳琦 | 申請(專利權)人: | 天津大學 |
| 主分類號: | C12P17/18 | 分類號: | C12P17/18;C12R1/465 |
| 代理公司: | 天津市北洋有限責任專利代理事務所 12201 | 代理人: | 王麗 |
| 地址: | 300350 天津市津南區海*** | 國省代碼: | 天津;12 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 利用 化學 觸發 提升 fk506 產量 方法 | ||
1.利用化學觸發劑提升FK506產量的方法,其特征是步驟如下:
1)液體種子培養:在無菌條件下,將筑波鏈霉菌(S.tsukubaensis)D852 CGMCC 7180接種于固體培養基中,于28℃恒溫培養20d后,接種于液體種子培養基中;液體種子培養的裝液量為40mL/250mL,于28℃,220rpm恒溫震蕩培養48h,獲得液體發酵種子液;
2)液體發酵培養:按10%接種量將步驟1)中的種子液接入裝有為40mL液體發酵培養基中,于28℃,220rpm恒溫震蕩培養96h后,將化學觸發劑添加到FK506發酵培養基中,并繼續發酵培養72h后,發酵結束,并從發酵液中提取FK506原料產品;化學觸發劑為組蛋白抑制劑50μmol/L的丁酸鈉和稀土元素50μmol/L的LaCl3組合;或含硫化合物100mmol/L的DMSO和稀土元素50μmol/L LaCl3組合;
3)FK506提取與產量測定:將步驟2)中經添加化學觸發劑,且繼續發酵72h后所獲得的發酵液,按1:2.5體積比的比例加入無水乙醇,50℃恒溫密封提取2h,5000rpm離心取上清液,HPLC測定FK506產量。
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