[發(fā)明專利]一種測定消毒后廢水中消毒副產(chǎn)物聯(lián)合生物毒性的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810083438.9
• 申請日: 2018-01-29
• 公開（公告）號(hào): CN108196022B
• 公開（公告）日: 2019-11-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 繆恒鋒;張雅晶;祝志超;張曉夏;張周;阮文權(quán)
• 申請（專利權(quán)）人: 江南大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N33/18
• 分類號(hào): G01N33/18
• 代理公司: 23211 哈爾濱市陽光惠遠(yuǎn)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司
• 代理人: 張勇<國際申請>=<國際公布>=<進(jìn)入國

1.一種評(píng)價(jià)消毒后廢水中消毒副產(chǎn)物生物毒性的方法，其特征在于，將馴養(yǎng)后的斑馬魚暴露在消毒前和消毒后的廢水環(huán)境中，暴露12～15d時(shí)測定消毒前后廢水中的總有機(jī)鹵TOX，以TOX作為評(píng)價(jià)消毒副產(chǎn)物總量的指標(biāo)，并通過對比斑馬魚體內(nèi)抗氧化酶指標(biāo)來評(píng)價(jià)消毒副產(chǎn)物的生物毒性；

具體包括如下步驟：

(1)馴養(yǎng)斑馬魚；

(2)設(shè)置兩組空白組：空白1將斑馬魚暴露在曝氣24h后的脫氯自來水中，空白2將斑馬魚暴露在加入次氯酸鈉24h后再加入終止劑的脫氯自來水中；設(shè)置兩組暴露組：暴露組1將斑馬魚暴露在未消毒的廢水中；暴露組2將斑馬魚暴露在次氯酸鈉消毒24h后加入終止劑硫代硫酸鈉的廢水中；

(3)于第15d測定暴露組1和暴露組2水體中TOX濃度，并測定斑馬魚體內(nèi)的BCA蛋白含量，醛基MDA含量和過氧化氫酶CAT活性；

(4)總消毒副產(chǎn)物定量：消毒后廢水中總DBPs濃度＝暴露組2和暴露組1的TOX差值，即(TOX_暴露2-TOX_暴露1)；

(5)判斷消毒副產(chǎn)物的生物毒性：暴露組1的酶活指標(biāo)相比空白1有顯著差異，暴露組2酶活指標(biāo)相比空白2有顯著差異，且(CAT₂-CAT_空白2)相比(CAT₁-CAT_空白1)顯著抑制，(MDA₂-MDA_空白2)相比(MDA₁-MDA_空白1)顯著增加，則認(rèn)為實(shí)驗(yàn)用水有亞急性生物毒性，反之無亞急性毒性。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述抗氧化酶指標(biāo)是指過氧化氫酶活性和醛基含量。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述馴養(yǎng)是將斑馬魚在脫氯自來水中馴養(yǎng)14d。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述消毒后廢水是經(jīng)過次氯酸鈉消毒24h后加入終止劑硫代硫酸鈉終止反應(yīng)的污水。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法具體包括如下步驟：

(1)馴養(yǎng)斑馬魚：以平均體長1.93±0.2cm，平均體重0.25±0.05g的幼年斑馬魚為用于評(píng)估的生物，用曝氣48h后的自來水馴養(yǎng)14d，水溫為(25±1)℃，光暗比為12h:12h，溶解氧DO保持在7.0mg.L^-1以上，馴養(yǎng)期間斑馬魚死亡率小于5％方可用于下一步驟；馴養(yǎng)期間每天喂食一次，暴露在廢水前24h停止喂食，暴露在廢水的0～15天內(nèi)不喂食；

(2)亞急性毒性測試：設(shè)置兩組空白組，空白1實(shí)驗(yàn)用水為曝氣24h后的脫氯自來水，空白2實(shí)驗(yàn)用水為加入次氯酸鈉24h后再加入終止劑的脫氯自來水；設(shè)置兩組暴露組，暴露組1實(shí)驗(yàn)用水為未消毒的廢水；暴露組2為次氯酸鈉消毒24h后加入終止劑硫代硫酸鈉的廢水；實(shí)驗(yàn)時(shí)間為15d；

(3)分別向各組中加入20條斑馬魚，于第15d測定暴露組1和暴露組2水體中TOX濃度，并測定斑馬魚體內(nèi)的BCA蛋白含量，醛基含量和過氧化氫酶活性；消毒后廢水中總DBPs濃度為暴露組2和暴露組1的TOX差值(TOX_暴露2-TOX_暴露1)；

(4)判斷消毒副產(chǎn)物的生物毒性的判據(jù)為：暴露組1的酶活指標(biāo)相比空白1有顯著差異，暴露組2酶活指標(biāo)相比空白2有顯著差異，且(CAT₂-CAT_空白2)相比(CAT₁-CAT_空白1)顯著抑制，(MDA₂-MDA_空白2)相比(MDA₁-MDA_空白1)顯著增加，則認(rèn)為實(shí)驗(yàn)用水有亞急性生物毒性，反之無亞急性毒性。

6.根據(jù)權(quán)利要求1或5任一所述的方法，其特征在于，所述廢水采用次氯酸鈉消毒，反應(yīng)時(shí)間24h；反應(yīng)溫度25℃；NaClO投加量按照Cl：DOC＝5:1投加；24h后測定余氯，按照摩爾比120％投加硫代硫酸鈉終止氯化反應(yīng)。

7.權(quán)利要求1～6任一所述方法在環(huán)境領(lǐng)域水體評(píng)價(jià)方面的應(yīng)用。