[發明專利]一種發酵生產洛伐他汀用米孢子培養基及米孢子的制備方法

有效

• 申請號: 201810082826.5
• 申請日: 2018-01-29
• 公開（公告）號: CN108977473B
• 公開（公告）日: 2021-08-27
• 發明（設計）人: 陳華橋;張葵
• 申請（專利權）人: 北大方正集團有限公司;北大醫藥重慶大新藥業股份有限公司;北大醫療產業集團有限公司
• 主分類號: C12P17/06
• 分類號: C12P17/06;C12N3/00;C12R1/66
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王瑩;吳歡燕

1.一種發酵生產洛伐他汀用米孢子的培養基，其特征在于，所述培養基由大米和營養液混合制備而成；每100重量份的所述營養液中包括葡萄糖10 份，酵母抽提物10份，余量為純化水；所述大米與所述營養液的質量比為1:0.05~0.2；

所述大米與營養液混合前，進行如下預處理：

1）用純化水對大米進行浸泡；

2）將浸泡后的大米和水的混合物進行翻炒，炒至無可見流動水；

3）將炒好的大米進行蒸制后冷卻，晾至所述大米中的水分含量為40~60%，得預處理完的大米；所述步驟1）中，純化水的添加量為大米質量的50%~70%，浸泡時間為2~6小時。

2.根據權利要求1所述的培養基，其特征在于，所述大米與所述營養液的質量比為1:0.05~0.15。

3.根據權利要求1所述的培養基，其特征在于，所述步驟2）在翻炒的過程中控制溫度為70~130℃；

和/或，所述步驟3）在蒸制的過程中，控制溫度為90~105℃，蒸制時間為5~20分鐘。

4.根據權利要求1~3任一項所述的培養基，其特征在于，所述大米為粳米。

5.利用權利要求1~4任一項所述的米孢子的培養基制備米孢子的方法，其特征在于，包括如下步驟：

1）將所述培養基滅菌后在其中接種孢子懸液，攪拌均勻；

2）將接種孢子懸液后的培養基在溫度25~29℃的條件下靜置培養7~12天，收獲成熟的米孢子。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述滅菌的條件為在溫度118~123℃的條件下滅菌20~40分鐘。

7.根據權利要求5或6所述的方法，其特征在于，所述步驟1）中將培養基以30-80g/瓶分裝到500ml的培養瓶中；和/或，所述孢子的接種量為1×10⁷~5×10⁹個/瓶。

8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，將所述培養基以50g/瓶分裝到500ml的培養瓶中；和/或，所述孢子的接種量為3×10⁸個/瓶。

9.根據權利要求5~8任一項所述的方法，其特征在于，所述孢子由發酵生產洛伐他汀的微生物菌種產生。

10.根據權利要求9所述的方法，其特征在于，所述孢子由紅曲霉、土曲霉或土曲霉的變種產生。