[發明專利]一種提取分離冬凌草甲素的方法

有效

• 申請號: 201810080252.8
• 申請日: 2018-01-27
• 公開（公告）號: CN110092796B
• 公開（公告）日: 2021-04-09
• 發明（設計）人: 云志;李昌輝
• 申請（專利權）人: 南京工業大學
• 主分類號: C07D493/08
• 分類號: C07D493/08;C07D493/10
• 代理公司: 深圳市蘭鋒盛世知識產權代理有限公司 44504
• 代理人: 羅炳鋒

本發明涉及一種提取分離冬凌草甲素的方法，將含冬凌草甲素的植物原料，采用含有有機溶劑的混合溶劑對冬凌草甲素進行浸取，固液分離后得到提取液；向提取液中加入少量的水，于低溫環境中進行沉析，分離，沉淀即冬凌草甲素粗提取物；重復進行此步驟多次，直到沒有沉淀析出為止；將分離出來的提取液進行溶劑回收，得到新鮮溶劑和浸膏，浸膏也是冬凌草甲素粗提取物；將適量的提取液與新鮮溶劑混合制成上述的混合溶劑，用于套用。本方法可節約溶劑，增大提取液的濃度，利于后續冬凌草甲素的析出。此外，分步添加水改變提取液極性，并配以低溫放置，可得到不同含量的冬凌草甲素粗產品，低溫沉析還使冬凌草甲素避免高溫，利于冬凌草甲素的穩定。

技術領域

本發明屬于生物化工技術領域，涉及一種從含冬凌草甲素植物中提取分離冬凌草甲素的方法，特別是涉及采用溶劑套用提取，添加水以改變溶劑極性，然后低溫沉析的方法。

背景技術

冬凌草甲素是冬凌草中一種二萜類物質，其結構式如圖1所示。

冬凌草和毛葉香茶菜，同屬于唇形科香茶菜屬植物，因為其獨特的藥用價值，在我國民間廣泛使用。文獻中報道它們有治療若干癌癥、咽喉腫痛，以及健胃，活血化瘀的功效。現代醫學研究表明冬凌草和毛葉香茶菜之所以有藥用價值主要是因為它們含有二萜類化合物冬凌草甲素。冬凌草甲素能夠很好的抑制腫瘤細胞增殖，對乳腺癌、食道癌、胰腺癌等癌癥的治療效果較好。由于冬凌草甲素的這些抗腫瘤性質，近年來受到了國內外學者的廣泛關注，而提取分離冬凌草甲素也成為研究的重要內容。

最常用的提取冬凌草甲素的溶劑是乙醇。冬凌草甲素在提取液中的穩定性比較差，主要是因為其活性中心α-亞甲基環戊烷比較活潑，受熱時容易發生化學反應。傳統的溶劑提取方法消耗溶劑量比較大，加熱回收溶劑時冬凌草甲素損失比較大。若干新的分離手段，如超臨界流體提取法也被實驗用于提取冬凌草甲素，但是涉及到設備投資、操作成本等問題，并不能適用于工業化生產。

發明內容：

本發明的目的是提供一種低成本，高回收率的提取分離冬凌草甲素的方法，適合于大規模處理冬凌草和毛葉香茶菜，提取分離得到質量含量較高的冬凌草甲素粗提取物。

本發明的方法包括以下步驟：

(1)首次提取時，將含冬凌草甲素的植物原料，即冬凌草或者毛葉香茶菜，用有機溶劑，如乙醇浸取2－3小時，乙醇的含水量為0％～15％，固液分離后得到提取液。

(2)將得到的一部分提取液，加入1％～30％的水，然后放置于-25～0℃的低溫環境中，一段時間后，將沉析出的沉淀與液體分離，沉淀即冬凌草甲素粗提取物。此步驟可以重復進行若干次即停止，也可以重復進行此步驟多次，直到沒有沉淀析出為止。

(3)將步驟(2)中完成固液分離的提取液進行溶劑回收，分別得到新鮮溶劑和浸膏，浸膏也是冬凌草甲素粗提取物。

(4)將另外一部分提取液用于套用，即與新鮮溶劑合并混合制成混合溶劑。

當再次進行提取分離時，步驟(1)中的浸取采用混合溶劑，增大了冬凌草甲素在提取液中的濃度，可節約成本。

浸取時采用的是套用溶劑的方法制成混合溶劑。混合溶劑是指新鮮溶劑和使用過的溶劑，即以往浸取得到的提取液，按混合溶劑中提取液所占的重量比為20％－40％的比例制成混合溶劑。利用混合溶劑對冬凌草甲素進行提取。

在開始添加少量水的時候，可以將色素等主要雜質優先沉析出來，后面得到沉淀中冬凌草甲素含量比較高，而且色澤比較好。

本發明的技術方案的有益效果是：

采用溶劑套用的方式提取冬凌草甲素，節約了溶劑，同時增大了冬凌草甲素在提取液中的濃度，較高的濃度將有利于后續的析出步驟；

通過分步添加適量的水改變提取液極性，并配以低溫放置，析出得到不同含量的冬凌草甲素粗產品，這些不同含量的冬凌草甲素粗產品可以被用于不同的終端產品；