[發明專利]一種金線蓮苷的提取方法

有效

• 申請號: 201810074076.7
• 申請日: 2018-01-25
• 公開（公告）號: CN108299528B
• 公開（公告）日: 2021-04-09
• 發明（設計）人: 楊碧云;曾黎輝;張躍華;張夢媛;馬星
• 申請（專利權）人: 福建農林大學;福建貢享生態農業科技有限公司
• 主分類號: C07H17/04
• 分類號: C07H17/04;C07H1/08
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

本發明涉及植物有效成分提取領域，具體涉及一種金線蓮苷的提取方法。本發明采用超聲波輔助法進行提取，超高效液相色譜方法測定含量，并利用響應面法對提取工藝進行優化。本發明得出最佳提取工藝條件為：溫度為35.00℃，甲醇濃度為16.33%，料液比為1:10.83，在此條件下，金線蓮苷提取率達到33%DW。

技術領域

本發明涉及植物有效成分提取領域，具體涉及一種金線蓮苷的提取方法。

背景技術

金線蓮為蘭科植物花葉開唇蘭Anoectochilusroxburghii(Wall)Lindl，味甘，性寒，歸肺、肝、腎、膀胱經，具有清熱涼血，祛風利濕，解毒的功效，主治肺熱咳嗽，咯血，尿血，小兒急驚風，黃疸，水腫，淋證，消渴，風濕痹痛，跌打損傷，毒蛇咬傷，現代用于肝炎，腎炎，膀胱炎，糖尿病，支氣管炎，風濕性關節炎等病。金線蓮主要分布在我國的福建、臺灣、云南等省，在印度、日本、尼泊爾和斯里蘭卡等國也有分布。金線蓮其主要成分為糖苷、生物堿、甾體、黃酮、牛磺酸、氨基酸、微量元素等。具相關文獻表明金線蓮能直接作用于肝細胞膜，保護肝細胞膜的完整，防止有害物質破壞肝細胞膜，并防止肝細胞之病變性壞死。而起到這種作用的物質主要為金線蓮苷，同時金線蓮苷也為花葉開唇蘭的特有化合物。

張超等(《HPLC-ELSD法測定三種植物基原金線蓮的金線蓮苷含量》)研究33批次金線蓮的金線蓮苷含量在6.37％～22.66％之間，平均含量為15.00％。張錦文等(《高效液相色譜法測定金線蓮中金線蓮苷的含量》中公開了提取獲得的野生金線蓮中金線蓮苷含量為16.57％，目前來看關于金線蓮苷的具體提取工藝的報道，提取率都比較低。

發明內容

本發明的目的在于提供一種金線蓮苷的提取方法。本發明采用超聲波輔助法進行提取，超高效液相色譜方法測定含量，并利用響應面法對提取工藝進行優化。

為實現上述目的，本發明采用如下技術方案：

所述金線蓮苷的提取方法，具體為：

(1)將金線蓮凍干粉末0.5g按1:20料液比用2mL甲醇溶解，在功率為420W，溫度為30℃條件下超聲波輔助提取45min，離心(10000rpm/min,10min)后吸取上清液，重復2次，合并上清液，用甲醇定容至2ml。過0.22μm濾膜，放入棕色色譜瓶中待用。

(2)金線蓮植株凍干粉末分別對提取液甲醇濃度、料液比、超聲功率、時間、溫度和提取次數等單因素進行優化，各因素水平設計見表1。

表1 單因素試驗設計

(3)通過響應面法設計試驗最終確定金線蓮苷的提取工藝參數。

本發明的顯著優點在于：

本發明采用超聲波輔助法進行提取，超高效液相色譜方法測定含量，并利用響應面法對提取工藝進行優化。結果表明，甲醇濃度為20％，超聲波功率360W，料液比為1:15，在40℃下超聲20min并提取2次，是單因素試驗的最佳結果。為研究各工藝參數之間的交互作用對金線蓮苷得率的影響，選用中心復合模型，采用3因素3水平共17個試驗點(5個中心點用以估計試驗誤差)的響應面分析試驗，將所得的數據用Design-Expert 8.0軟件進行分析，以超聲溫度(A)、甲醇濃度(B)和料液比(C)為自變量，以金線蓮苷的得率(％)為響應值，經回歸擬合得到二次回歸方程Y＝30.31-3.11A-1.69B-2.26C-0.082AB+1.95AC+0.94BC-7.64A²-3.80B²-0.038C²。方程中各項系數絕對值的大小直接反映了各因素對指標值的影響程度，系數的正負反映了影響的方向。由此得出最佳提取工藝條件為：溫度為35.00℃，甲醇濃度為16.33％，料液比為1:10.83，在此條件下，金線蓮苷提取率達到33％DW。

附圖說明