[發明專利]一種生物膠原提取物的提取方法在審
| 申請號： | 201810072396.9 | 申請日： | 2018-01-25 |
| 公開（公告）號： | CN108191970A | 公開（公告）日： | 2018-06-22 |
| 發明（設計）人： | 儲浩俠 | 申請（專利權）人： | 安徽誠亞生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C07K14/78 | 分類號： | C07K14/78;C07K1/30;C12P21/06 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 230000 安徽省合肥*** | 國省代碼： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 生物膠原 脫脂 提取物 切片 浸泡 膠原蛋白 提取效率 有效結合 堿溶液 酶解 酸法 酸提 鹽提 斬拌 清洗 | ||
1.一種生物膠原提取物的提取方法，其特征在于：包括以下步驟：
1）將新鮮豬皮去除雜質后清洗，對組織進行切片，再將切片組織清洗浸泡在0.1%~40%(W/V)的堿溶液中，浸泡0.5~24h；
2）脫脂:先將豬皮放在燒杯容器中，加豬皮重量4-5倍30-50℃的溫水，然后再加水體積一半的脫脂液，充分攪拌10-30分鐘后，濾去上層液體，按上述方法再重復脫脂一次，最后用30-50℃水漂洗；
3）鹽提:取脫脂后豬皮加等量的等滲鹽水于恒溫水浴鍋內，于60℃下保持2-4小時，恒溫期間需要充分攪拌，使豬皮均勻受熱，然后過濾，濾液留存，準備下一步酸提；
4）酸提:用與豬皮等量的醋酸緩沖液于50-70℃水浴條件下處理6-9小時，方法與鹽
提相同，然后過濾，濾液留存；
5）斬拌:將步驟4）的提取剩余物放入斬拌機內斬拌至1-2mmz，邊斬拌邊加酶解液，使組織分散進酶解液中，2~40°C環境酶解1~72h；酶解完畢后堿液調PH值至7~13，2~40°C靜置2~24h；30~150目濾網過濾，去除未酶解物；
6）冷凍干燥。
2.根據權利要求1所述的一種生物膠原提取物的提取方法，其特征在于：步驟5）中所述酶解液為酸性蛋白酶，效價為1:1500~1:12000，酸性蛋白酶：組織切片為1:50~1:1000(W/W);酶解液PH值為2~6。
3.根據權利要求1所述的一種生物膠原提取物的提取方法，其特征在于：上述步驟5）斬拌機的轉速要求在1500轉/分以上，并且斬拌機內溫度低于20℃。
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