[發(fā)明專利]靶向CSF1R嵌合抗原受體修飾的NK92MI細胞和T細胞及其制法和應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810069667.5
• 申請日: 2018-01-24
• 公開（公告）號: CN108276495B
• 公開（公告）日: 2022-03-18
• 發(fā)明（設計）人: 楊林;張平
• 申請（專利權(quán)）人: 博生吉醫(yī)藥科技（蘇州）有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;A61K35/17;A61P35/00
• 代理公司: 上海一平知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31266
• 代理人: 王正君;崔佳佳

1.一種嵌合抗原受體CAR，其特征在于，所述嵌合抗原受體CAR包含抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域，所述抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域特異性結(jié)合于CSF1R抗原，

所述的CAR的結(jié)構(gòu)如式I所示：

L-scFv-Z-TM-C-CD3ζ (I)

式中，

各“-”獨立地為連接肽或肽鍵；

L為任選的信號肽序列；

scFv為靶向CSF1R的抗體單鏈可變區(qū)序列；和

Z為無或Fc序列；

TM為跨膜結(jié)構(gòu)域；

C為共刺激信號分子；

CD3ζ為源于CD3ζ的胞漿信號傳導序列；

所述的scFv的結(jié)構(gòu)如式A3所示：

V_H2-V_L2 (A3)；

其中，V_L2為抗CSF1R抗體的輕鏈可變區(qū)；V_H2為抗CSF1R抗體的重鏈可變區(qū)；“-”為連接肽(或柔性接頭)或肽鍵；

V_L2的氨基酸序列如SEQ ID NO.:2的第159-264位所示，且V_H2的氨基酸序列如SEQ IDNO.:2的第23-138位所示。

2.如權(quán)利要求1所述的嵌合抗原受體CAR，其特征在于，所述CAR的氨基酸序列如SEQ IDNO.:2所示。

3.一種核酸分子，其特征在于，所述核酸分子編碼權(quán)利要求1所述的嵌合抗原受體(CAR)。

4.一種載體，其特征在于，所述的載體含有權(quán)利要求3所述的核酸分子。

5.一種宿主細胞，其特征在于，所述的宿主細胞含有權(quán)利要求4所述的載體或染色體中整合有外源的權(quán)利要求3所述的核酸分子或表達權(quán)利要求1所述的CAR。

6.一種制備工程化免疫細胞的方法，其特征在于，所述的工程化免疫細胞表達權(quán)利要求1所述的CAR，包括以下步驟：將權(quán)利要求3所述的核酸分子或權(quán)利要求4所述的載體轉(zhuǎn)導入T細胞或NK細胞內(nèi)，從而獲得所述工程化免疫細胞。

7.一種藥物組合物，其特征在于，所述藥物組合物含有權(quán)利要求1所述的嵌合抗原受體、權(quán)利要求3所述的核酸分子、權(quán)利要求4所述的載體、或權(quán)利要求5所述的細胞，以及藥學上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。

8.一種如權(quán)利要求1所述的嵌合抗原受體、權(quán)利要求3所述的核酸分子、權(quán)利要求4所述的載體、或權(quán)利要求5所述的細胞的用途，其特征在于，用于制備殺傷腫瘤微環(huán)境的M2型腫瘤相關(guān)的巨噬細胞的藥物或制劑。

9.一種用于制備權(quán)利要求5所述細胞的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒含有容器，以及位于容器內(nèi)的權(quán)利要求3所述的核酸分子、或權(quán)利要求4所述的載體。

10.一種權(quán)利要求5所述細胞、或權(quán)利要求7所述的藥物組合物的用途，其特征在于，用于制備一藥物，所述藥物用于殺傷腫瘤微環(huán)境的M2型腫瘤相關(guān)的巨噬細胞。