[發(fā)明專利]紫杉醇長循環(huán)熱敏脂質(zhì)體的制備方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201810069408.2
• 申請日: 2018-01-24
• 公開（公告）號: CN108175747A
• 公開（公告）日: 2018-06-19
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 顧生玖;朱開梅;趙文鵬;李美波
• 申請（專利權(quán)）人: 桂林醫(yī)學(xué)院
• 主分類號: A61K9/127
• 分類號: A61K9/127;A61K31/337;A61K47/24;A61K41/00;A61P15/14;A61P35/00
• 代理公司: 桂林市華杰專利商標(biāo)事務(wù)所有限責(zé)任公司 45112
• 代理人: 楊雪梅

本發(fā)明公開了紫杉醇長循環(huán)熱敏脂質(zhì)體的制備方法，包括以下步驟：稱取處方量的氫化大豆磷脂(HSPC)?膽固醇(CH)，比例HSPC﹕CH=3﹕1(質(zhì)量比，藥脂比1:33，摩爾比）置于茄形瓶中；按三氯甲烷:甲醇=3:1加入適量的三氯甲烷和甲醇的混合溶液，溶解；溶液溶解后，置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，50℃水浴，減壓除去有機(jī)溶劑，并在氮?dú)鈼l件下除去殘留有機(jī)溶劑；去有機(jī)溶劑后，加入適量PBS（pH 7.4）溶液，在50℃旋轉(zhuǎn)水化45min，減壓脫氣，置于高壓均質(zhì)機(jī)中，使平均粒徑在l00nm左右，冷凍干燥，得到凍干脂質(zhì)體，4?8℃貯藏。制備的紫杉醇長循環(huán)熱敏脂質(zhì)體在聯(lián)合熱療后，在體內(nèi)實驗中不僅減小紫杉醇藥物不良反應(yīng)，顯著增強(qiáng)了抗腫瘤效果，若能應(yīng)用于臨床，必將為紫杉醇的應(yīng)用開發(fā)一條新的途徑。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，具體是采用薄膜超聲法制備紫杉醇長循環(huán)脂質(zhì)體的方法及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

脂質(zhì)體是一種人工球形小囊泡，是由膽固醇和天然無毒性的磷脂構(gòu)成。由于其較小的粒徑，以及疏水及親水的特性(除了生物相容性)，脂質(zhì)體作為一種新型藥物遞送系統(tǒng)(new drug delivery system,NDDS)，具有廣闊的應(yīng)用前景。脂質(zhì)體之所以具有吸引力是有賴于它們的組成成分使他們具有生物相容性和生物降解能力。脂質(zhì)體是由一層或多層天然或合成磷脂組成的脂質(zhì)雙分子層，這種由天然磷脂所組成的雙分子層結(jié)構(gòu)具有生物學(xué)惰性和微弱的免疫原性，以及較低的內(nèi)在毒性，因此，作為藥物載體，它具備一些獨(dú)特的作用特點(diǎn)：(1)不同親脂性的藥物均可以包封在脂質(zhì)體內(nèi)。(2)能選擇性地殺傷或抑制腫瘤細(xì)胞；(2)可針對特定病變部位進(jìn)行被動或主動靶向給藥，提高藥物的生物利用度；(3)增加藥物與癌細(xì)胞的親和力，提高抗腫瘤藥物療效；(4)可顯著降低抗腫瘤藥物的毒副作用；(5)可以適用于多種給藥途徑。

脂質(zhì)體在機(jī)體內(nèi)，可被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬，從而可激活機(jī)體自身免疫功能，進(jìn)而達(dá)到抗腫瘤效果，因此，在腫瘤的治療中彰顯出巨大的優(yōu)勢。但脂質(zhì)體的熱力學(xué)不穩(wěn)定以及機(jī)體血液中多種破壞因素使傳統(tǒng)的脂質(zhì)體在體內(nèi)半衰期僅十幾分鐘，因此限制了其作為藥物載體的應(yīng)用。

因此，在二十世紀(jì)末，人們就發(fā)現(xiàn)由神經(jīng)節(jié)苷(GM1)制備的脂質(zhì)體，可明顯延長體內(nèi)的血液循環(huán)時間。但由于神經(jīng)節(jié)昔脂價格昂貴，不論是合成還是提取都相對較困難，因此各位學(xué)者開始用聚乙二醇PEG替代神經(jīng)節(jié)苷制備長循環(huán)脂質(zhì)體，并在脂質(zhì)體內(nèi)加入熱敏材料，制備成長循環(huán)熱敏脂質(zhì)體，包裹藥物后聯(lián)合局部熱療，即可延長藥物在體內(nèi)的循環(huán)時間，又可靶向?qū)⑺幬镝尫庞谀[瘤部位，達(dá)到靶向治療的效果。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供采用薄膜超聲法制備紫杉醇長循環(huán)脂質(zhì)體的方法及其應(yīng)用，選取穩(wěn)定性良好的氫化大豆磷脂為膜材，采用薄膜超聲法制備紫杉醇長循環(huán)脂質(zhì)體。

本發(fā)明紫杉醇長循環(huán)熱敏脂質(zhì)體的制備方法，包括以下步驟：

(1)稱取處方量的氫化大豆磷脂(HSPC)-膽固醇(CH)，比例HSPC﹕CH＝3﹕1(質(zhì)量比，藥脂比1:33，摩爾比)置于茄形瓶中；

(2)按三氯甲烷:甲醇＝3:1加入適量的三氯甲烷和甲醇的混合溶液，溶解；

(3)溶液溶解后，置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，50℃水浴，減壓除去有機(jī)溶劑，并在氮?dú)鈼l件下除去殘留有機(jī)溶劑；

(4)去有機(jī)溶劑后，加入適量PBS溶液，在50℃旋轉(zhuǎn)水化45min，減壓脫氣，置于高壓均質(zhì)機(jī)中，壓力15000psi依次通過200nm，100nm的聚碳酸酯膜各3次，使平均粒徑在l00nm左右，冷凍干燥，得到凍干脂質(zhì)體。

上述步驟(3)所述旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀的V_1/2>最大轉(zhuǎn)速，減壓40min。

上述步驟(4)所述PBS溶液的pH為7.4。

上述步驟(4)得到的凍干脂質(zhì)體在4-8℃貯藏。