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[發明專利]miR-351基因的應用在審

專利信息
申請號: 201810068418.4 申請日: 2018-01-24
公開(公告)號: CN108359690A 公開(公告)日: 2018-08-03
發明(設計)人: 張沛;劉聰;蔡建明;高福;程贏;楊彥勇;劉虎;趙海男;杜繼聰;東肅河 申請(專利權)人: 中國人民解放軍第二軍醫大學
主分類號: C12N15/85 分類號: C12N15/85;C12N15/113;A01K67/027
代理公司: 上海元一成知識產權代理事務所(普通合伙) 31268 代理人: 趙青
地址: 200433 *** 國省代碼: 上海;31
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摘要:
搜索關鍵詞: 應用 造血系統損傷 基因抑制劑 造血干細胞 電離輻射 調控機制 研究動物 制備造血干細胞 生物技術領域 輻射敏感性 動物模型 醫藥用途 治療藥物 基因 構建 制備 研究 疾病 治療
【權利要求書】:

1.miR-351基因抑制劑或沉默劑在制備造血干細胞調控機制研究動物模型中的應用。

2.根據權利要求1所述的miR-351基因抑制劑或沉默劑在制備造血干細胞調控機制研究動物模型中的應用,其特征在于,所述的miR-351基因抑制劑或沉默劑為:MiR351-g51,其序列如SEQ ID NO.1所示。

3.根據權利要求1所述的miR-351基因抑制劑或沉默劑在制備造血干細胞調控機制研究動物模型中的應用,其特征在于,所述的miR-351基因抑制劑或沉默劑為:MiR351-g34,其序列如SEQ ID NO.8所示。

4.miR-351基因抑制劑或沉默劑在制備治療電離輻射所致造血系統損傷藥物中的應用。

5.根據權利要求4所述的miR-351基因抑制劑或沉默劑在制備治療電離輻射所致造血系統損傷藥物中的應用,其特征在于,所述的miR-351基因抑制劑或沉默劑為:MiR351-g51,其序列如SEQ ID NO.1所示。

6.根據權利要求4所述的miR-351基因抑制劑或沉默劑在制備治療電離輻射所致造血系統損傷藥物中的應用,其特征在于,所述的miR-351基因抑制劑或沉默劑為:MiR351-g34,其序列如SEQ ID NO.8所示。

7.一種造血干細胞調控機制研究動物模型的構建方法,其特征在于,包括以下步驟:

A)miR-351基因敲除Founder鼠的建立:

選取MiR351-g51和MiR351-g34體外轉錄成mRNA,與Cas9蛋白一起顯微注射到小鼠受精卵中,獲得發生期望突變的首建小鼠;所述的MiR351-g51,其序列如SEQ ID NO.1所示;所述的MiR351-g34,其序列如SEQ ID NO.8所示;

B)兩周齡后,對出生的小鼠進行測序,對其進行基因型分析和鑒定;

C)miR-351基因敲除穩定遺傳F1代小鼠的建立:

將雄性Founder小鼠與野生型雌性小鼠交配獲得F1代雜合子小鼠,小鼠出生20天后PCR鑒定,若有陽性小鼠出生,則表示轉基因已經整合到生殖細胞;

D)將F1代雜合子小鼠雜交獲得F2代純合子小鼠,即為小鼠動物模型。

8.一種采用如權利要求7所述的構建方法得到的造血干細胞調控機制研究動物模型在篩選治療電離輻射所致造血系統損傷藥物中的應用。

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