[發明專利]一種香榧的組培繁殖方法

在審

• 申請號: 201810065239.5
• 申請日: 2018-01-23
• 公開（公告）號: CN108308024A
• 公開（公告）日: 2018-07-24
• 發明（設計）人: 朱邵峰
• 申請（專利權）人: 合肥浦邦農業科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 合肥道正企智知識產權代理有限公司 34130
• 代理人: 張浩

1.一種香榧的組培繁殖方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)外植體消毒：從茁壯健康、品質優良的香榧植株上獲取完好的香榧種子作為組培繁殖的外植體，先將香榧種子用無菌水沖洗1-2次，再將清洗后的種子置于體積濃度為65-75％竹醋液中浸泡40-50min，浸泡結束后，用無菌水沖洗2-3次，然后用質量濃度為0.2-0.4％的HgCl₂溶液浸泡10-20min，最后用無菌水沖洗3-5遍，并結合用無菌濾紙吸干水分備用；

(2)誘導培養：將消毒后的香榧種子接種于誘導培養基中培養12-16天，使其發芽長出幼苗，其培養條件為：采用紅光或藍光照射，培養溫度為15±1℃，培養濕度為75％-85％，光照時間為12±1h/d，光照強度為1800-2200lx；

(3)增殖培養：用無菌刀切取步驟(2)中形成的幼苗，將該幼苗接種于增殖培養基中培養24-28天，使其叢生芽生成，長至2.5-4.0cm；其中的增殖培養基所含組分為：1/2MS基本培養基+0.1-0.3mg/L NAA+0.2-0.4mg/L TDZ+0.4-0.8mg/L 6-BA+0.4-0.8mg/L水解酪蛋白+20-30g/L蔗糖+6-8g/L瓊脂，增殖培養的PH調至5.0-6.0；

(4)生根培養：用無菌刀切取步驟(3)中形成的叢生芽，接種于生根培養基中培養30-40天，得到生根的香榧無菌苗；其培養條件為：采用紅光、藍光、紅藍光交替照射，交替間隔為1-2h，培養溫度為18-24℃，培養濕度為70％-80％，光照時間為12±2h/d，光照強度為1800-2200lx；

(5)煉苗和馴化：將香榧無菌苗移至煉苗棚煉苗2-3天，然后假植于盛有基質的穴盤中；穴盤苗早期保持濕度75-85％，溫度18-32℃；后期逐漸加大通風量，噴施水溶性良好的復合肥料進行管理。

2.根據權利要求1所述的一種香榧的組培繁殖方法，其特征在于，所述誘導培養的培養條件為：采用藍光照射，培養溫度為15℃，培養濕度為80％，光照時間為12h/d，光照強度為2000lx。

3.根據權利要求1所述的一種香榧的組培繁殖方法，其特征在于，所述誘導培養基中所含組分為：N6基本培養基+0.2-0.4mg/L IAA+0.1-0.3mg/L KT+15-25g/L蔗糖+5g/L卡拉膠，誘導培養基的PH調至4.5-5.5。

4.根據權利要求1所述的一種香榧的組培繁殖方法，其特征在于，所述增殖培養基所含組分為：1/2MS基本培養基+0.2mg/L NAA+0.3mg/L TDZ+0.6mg/L 6-BA+0.6mg/L水解酪蛋白+25g/L蔗糖+7g/L瓊脂。

5.根據權利要求1所述的一種香榧的組培繁殖方法，其特征在于，所述增殖培養的培養條件為：采用紅光、藍光交替照射，交替間隔為1-3h，培養溫度為16±1℃，培養濕度為75％-85％，光照時間為12±1h/d，光照強度為1800-2200lx。

6.根據權利要求1所述的一種香榧的組培繁殖方法，其特征在于，所述生根培養的培養條件為：采用紅光、藍光、紅藍光交替照射，交替間隔為1.5h，培養溫度為21℃，培養濕度為75％，光照時間為12h/d，光照強度為2000lx。

7.根據權利要求1所述的一種香榧的組培繁殖方法，其特征在于，所述生根培養基所含組分為：1/2MS基本培養基+0.2-0.4mg/L NAA+0.3-0.5mg/L IBA+0.1-0.3mg/L6-BA+2-4g/L白柳皮提取物+30-40g/L蔗糖+4-8g/L瓊脂，誘導培養基的PH調至5.0-7.0。

8.根據權利要求1所述的一種香榧的組培繁殖方法，其特征在于，所述基質為草炭土、松木屑和珍珠巖按照3:1:1比例配比。