[發(fā)明專利]SIRT3在促進(jìn)老年人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞年輕化中的應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810064890.0
• 申請(qǐng)日: 2018-01-23
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108192925A
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-06-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李良;夏云峰
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院
• 主分類號(hào): C12N15/867
• 分類號(hào): C12N15/867;A61K48/00;A61P9/10;A61P35/00;A61P39/06
• 代理公司: 北京華際知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11676
• 代理人: 陳曉蕾

本發(fā)明涉及SIRT3在促進(jìn)老年人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞年輕化中的應(yīng)用。通過(guò)慢病毒載體將SIRT3基因?qū)肜夏耆酥鹃g充質(zhì)干細(xì)胞中，SIRT3的過(guò)表達(dá)使得老年人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞在應(yīng)激氧化、氧化損傷、細(xì)胞凋亡等方面中得到良好的改善。該調(diào)控機(jī)制能夠促進(jìn)老年人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞年輕化，并為衰老、心血管疾病、癌癥等病癥的治療提供思路。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及SIRT3在促進(jìn)老年人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞年輕化中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

Sirtuin(SIRT)蛋白是一種線粒體NAD依賴的III類去乙酰化酶，具有去乙酰基酶活性。哺乳動(dòng)物SIRT蛋白家族包括7個(gè)成員(SIRT1～SIRT7)，并定位于不同細(xì)胞器內(nèi)。SIRT1、SIRT6、SIRT7定位于細(xì)胞核中，SIRT2定位于細(xì)胞質(zhì)中，SIRT3、SIRT4、SIRT5定位于線粒體中。SIRT蛋白參與細(xì)胞增殖、衰老、凋亡、氧化應(yīng)激、新陳代謝調(diào)控、細(xì)胞壽命延長(zhǎng)等生物過(guò)程。SIRT3在代謝活躍的組織中高表達(dá)，例如心臟、肌肉、肝臟和褐色脂肪組織等。

慢病毒表達(dá)載體，包含包裝、轉(zhuǎn)染、穩(wěn)定整合所需要的遺傳信息。慢病毒載體可以將外源基因有效地整合到宿主染色體上，從而達(dá)到持久性表達(dá)目的序列的效果。在感染能力方面可有效地感染神經(jīng)元細(xì)胞、肝細(xì)胞、心肌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、干細(xì)胞等多種類型的細(xì)胞。對(duì)于一些較難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞，如原代細(xì)胞、干細(xì)胞等，使用慢病毒載體，能大大提高目的基因的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率，而且目的基因整合到宿主細(xì)胞基因組的幾率大大增加，能夠長(zhǎng)期、穩(wěn)定地表達(dá)。

脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(Adipose-Derived Stem Cells，ADSC)是一種中胚層來(lái)源的多能干細(xì)胞，具有自我更新及三系分化的潛能，可分化為脂肪細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、成骨細(xì)胞、肌肉細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、心肌細(xì)胞等多種細(xì)胞。ADSC可通過(guò)促進(jìn)血管生成和細(xì)胞存活等多種機(jī)制參與缺血組織的修復(fù)過(guò)程，是細(xì)胞治療的理想種子細(xì)胞。目前，自體ADSC已在臨床用于軟組織缺損修復(fù)，治療心肌缺血和神經(jīng)退行性病變。但是同樣存在一定的問(wèn)題，植入缺血區(qū)域的ADSC的低存活率嚴(yán)重限制了治療效果。氧化應(yīng)激損傷是造成植入?yún)^(qū)ADSC凋亡的主要原因之一。此外，年齡化因素對(duì)ADSC的細(xì)胞特性具有顯著影響。老年人ADSC細(xì)胞的老化程度更高，可能與細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)含量升高導(dǎo)致氧化應(yīng)激加強(qiáng)密切相關(guān)，導(dǎo)致ADSC細(xì)胞的增殖能力、遷移能力、分化能力都明顯降低。

可見(jiàn)，研究老年人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的生物調(diào)控機(jī)制，能夠更好地了解相關(guān)疾病的生物學(xué)機(jī)理。研究老年人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞年輕化，能夠?yàn)樗ダ稀⑿难芗膊　┌Y等病癥的治療開(kāi)拓新的前景。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供SIRT3在促進(jìn)老年人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞年輕化中的應(yīng)用。

本發(fā)明提供一種病毒載體，其包含SIRT3的編碼基因。

在一個(gè)方面中，所述病毒為慢病毒；優(yōu)選的，所述慢病毒為L(zhǎng)V5。

本發(fā)明還提供一種藥物組合物，其包含所述的病毒載體，以及藥學(xué)上可接受的輔料。

本發(fā)明還提供所述的病毒載體在制備抑制老年人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞氧化損傷的藥物中的應(yīng)用。

本發(fā)明還提供所述的病毒載體在制備促進(jìn)老年人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞年輕化的藥物中的應(yīng)用。

在一個(gè)方面中，所述SIRT3降低老年人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的凋亡率；優(yōu)選的，所述凋亡率降低4％左右、5％左右、6％左右、7％左右、8％左右、9％左右、或10％左右。

在一個(gè)方面中，所述SIRT3在老年人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞中的蛋白表達(dá)水平提高；優(yōu)選的，所述蛋白表達(dá)水平提高10％左右、20％左右、30％左右、40％左右、50％左右、60％左右、70％左右、80％左右、85％左右、87％左右、或90％左右。