[發明專利]D-雜環氨基酸的合成方法、試劑盒及應用有效
| 申請號： | 201810064771.5 | 申請日： | 2018-01-23 |
| 公開（公告）號： | CN108300744B | 公開（公告）日： | 2020-07-17 |
| 發明（設計）人： | 盧江平;董學武;張娜;李響;蔣相軍;黃鑫;劉芳;李少賀 | 申請（專利權）人： | 凱萊英醫藥集團(天津)股份有限公司 |
| 主分類號： | C12P17/12 | 分類號： | C12P17/12;C12P17/14;C12P17/04;C12P17/02;C12P17/00 |
| 代理公司： | 北京康信知識產權代理有限責任公司 11240 | 代理人： | 韓建偉;謝湘寧 |
| 地址： | 300457 天津市*** | 國省代碼： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 氨基酸 合成 方法 試劑盒 應用 | ||
1.一種D-雜環氨基酸的合成方法，其特征在于，所述合成方法包括：
采用SEQ ID NO:1所示的二氨基庚二酸脫氫酶將D-雜環類的酮酸類化合物轉化成D-雜環氨基酸。
2.根據權利要求1所述的合成方法，其特征在于，所述D-雜環類的酮酸類化合物選自如下任意一種：
所述D-雜環氨基酸選自如下任意一種：
3.根據權利要求1所述的合成方法，其特征在于，所述合成方法包括：
將所述D-雜環類的酮酸類化合物與氨基供體混合，在所述二氨基庚二酸脫氫酶及輔酶的作用下反應，得到所述D-雜環氨基酸。
4.根據權利要求3所述的合成方法，其特征在于，所述氨基供體選自甲酸銨或氯化銨。
5.根據權利要求3所述的合成方法，其特征在于，所述輔酶選自β-NADP+或β-NAD+。
6.根據權利要求3所述的合成方法，其特征在于，所述反應的pH為7.8～9.0。
7.根據權利要求3所述的合成方法，其特征在于，所述反應的溫度為30～40℃。
8.根據權利要求3所述的合成方法，其特征在于，所述反應在緩沖液中進行，所述緩沖液選自Tris-HCl鹽緩沖液、三乙醇胺緩沖液、磷酸鹽緩沖液或硼酸-氫氧化鈉緩沖液。
9.根據權利要求3至8中任一項所述的合成方法，其特征在于，所述合成方法包括：
將所述D-雜環類的酮酸類化合物與所述氨基供體混合，在所述二氨基庚二酸脫氫酶及所述輔酶的作用下反應，得到反應產物；
對所述反應產物進行后處理，得到所述D-雜環氨基酸。
10.根據權利要求9所述的合成方法，其特征在于，所述后處理的步驟包括：
向所述反應產物中添加反應終止液，得到終止體系；
將所述終止體系進行過濾，得到濾液；以及
對所述濾液中的目的產物進行純化，得到所述D-雜環氨基酸。
11.根據權利要求10所述的合成方法，其特征在于，所述反應終止液為鹽酸，所述鹽酸的添加量以使所述終止體系的pH≤1為準，所述過濾的步驟中采用硅藻土墊。
12.一種合成D-雜環氨基酸的試劑盒，所述試劑盒包括生物酶，其特征在于，所述生物酶為SEQ ID NO:1所示的二氨基庚二酸脫氫酶，所述試劑盒還包括D-雜環類的酮酸類化合物。
13.根據權利要求12所述的試劑盒，其特征在于，所述D-雜環類的酮酸類化合物為如下任意一種：
14.SEQ ID NO:1所示的二氨基庚二酸脫氫酶在篩選D-雜環氨基酸合成原料中的應用。
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