本發(fā)明屬于藍(lán)莓開放式植物組織培養(yǎng)的抑菌劑領(lǐng)域。具體是涉及藍(lán)莓開放式植物組織培養(yǎng)的抑菌組合物及其制備方法。本發(fā)明首先通過組分篩選試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)將大蒜、顛茄草和通城虎配比在一起得到的抑菌組合物，不僅能高效穩(wěn)定抑菌，還能顯著降低污染率，促進(jìn)根生長、增加試管苗的株高和鮮重。本發(fā)明進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，將大蒜、顛茄草和通城虎按照6?10:11?15:9?15的質(zhì)量比例進(jìn)行配比有較佳的協(xié)同效果，尤其是按照8:12:13的比例進(jìn)行配比后，三者之間具有極顯著的協(xié)同增效功效，可以有效控制傳統(tǒng)組培過程的污染問題，降低組培成本、簡化組培環(huán)節(jié)、提高種苗質(zhì)量。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及一種應(yīng)用于藍(lán)莓開放式組織培養(yǎng)的抑菌組合物，本發(fā)明進(jìn)一步涉及該抑菌組合物的制備方法，屬于藍(lán)莓開放式植物組織培養(yǎng)的抑菌劑領(lǐng)域。
背景技術(shù)
藍(lán)莓(Blueberry)也稱越橘，為杜鵑花科(Ericaceae)越橘屬(Vaccinium spp.)灌木果樹。果實(shí)為藍(lán)紫色小漿果，并披一層白色果粉，富含人體所需的多種維生素及微量元素，其營養(yǎng)價(jià)值遠(yuǎn)高于普通水果，被國際糧農(nóng)組織列為人類五大健康食品之一。近年來藍(lán)莓的社會(huì)需求量日益增長，藍(lán)莓種苗的供應(yīng)不能滿足市場(chǎng)的需求，常規(guī)種苗繁殖技術(shù)速度慢、品種易退化成為產(chǎn)業(yè)發(fā)展的主要制約因素。
目前通常采用組織培養(yǎng)手段對(duì)藍(lán)莓種苗進(jìn)行繁育，但在傳統(tǒng)的組培技術(shù)中，對(duì)無菌環(huán)境要求苛刻，對(duì)操作人員要求嚴(yán)格，污染率高、成本高、操作繁瑣、耗費(fèi)人力、移栽成活率低等問題一直困擾著組培工作者。因此降低組培成本、簡化組培環(huán)節(jié)、提高種苗質(zhì)量成為組培技術(shù)未來的發(fā)展方向。
近年來新興了一種開放式組織培養(yǎng)方法，通過向培養(yǎng)基中添加抑(殺)菌劑替代高壓滅菌、無菌接種和無菌培養(yǎng)，由于培養(yǎng)基不經(jīng)高壓滅菌，營養(yǎng)物質(zhì)和激素?fù)p失較少，同時(shí)容器內(nèi)培養(yǎng)基表面無積累水層，瓶內(nèi)濕度適中，瓶壁水珠少，透光性好，試管苗生長健壯，馴化成活率高。但尋找安全環(huán)保，無任何毒性，既能抑菌又能促進(jìn)藍(lán)莓苗木生長的抑菌劑還需進(jìn)一步研究。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有藍(lán)莓組織培養(yǎng)方式的不足，目地在于提供一種用于藍(lán)莓開放式組織培養(yǎng)的安全環(huán)保、無任何毒性的抑菌組合物，該抑菌組合物可以有效控制培養(yǎng)過程的污染問題，降低組培成本、簡化組培環(huán)節(jié)、提高藍(lán)莓種苗質(zhì)量。
為實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為：
本發(fā)明中抑菌組合物的獲得，將大蒜、顛茄草、通城虎、蒲公英、魚腥草進(jìn)行多次配比試驗(yàn)，篩選得到抑菌效果好且能有效促進(jìn)植物藍(lán)莓試管苗生長的最優(yōu)組合，如試驗(yàn)一(表1)和試驗(yàn)二(表3)。通過各抑菌組合物制備的抑菌培養(yǎng)基對(duì)于藍(lán)莓幼苗的培養(yǎng)數(shù)據(jù)，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，如試驗(yàn)一(表2)和試驗(yàn)二(表4)，最終篩選出最佳組合：大蒜、顛茄草和通城虎質(zhì)量比為8:12:13。
用于藍(lán)莓開放式植物組織培養(yǎng)的抑菌組合物，由以下原料制成：大蒜、顛茄草和通城虎。
上述方案中，優(yōu)選的各原料的重量份是：大蒜6-10份、顛茄草11-15份、通城虎9-15份。
上述方案中，更優(yōu)選的各原料的重量份是：大蒜8份、顛茄草12份、通城虎13份。
上述方案中，所述的大蒜素提取通過過濾方法獲得；
上述方案中，所述的顛茄草和通城虎提取通過煎煮方法獲得；
本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種制備抑菌組合物的方法：
(1)稱取大蒜、顛茄草和通城虎；
(2)將稱取的大蒜研磨，加水過濾離心取上清，即得大蒜素；
(3)將稱取的顛茄草和通城虎混合均勻后用水煎煮；煎煮液過濾，取濾液，即得；
(4)將(2)和(3)混合均勻即得抑菌組合物。
