[發明專利]一種用于測量人體單個血小板收縮力的裝置及方法

在審

• 申請號: 201810059691.0
• 申請日: 2018-01-22
• 公開（公告）號: CN108387720A
• 公開（公告）日: 2018-08-10
• 發明（設計）人: 張魯凝;周婭
• 申請（專利權）人: 同濟大學
• 主分類號: G01N33/49
• 分類號: G01N33/49
• 代理公司: 上海科盛知識產權代理有限公司 31225
• 代理人: 趙志遠

1.一種用于測量人體單個血小板收縮力的裝置，其特征在于，該裝置包括三維平臺、放置在三維平臺上的樣品池、激光檢測單元及照明單元，所述樣品池中放置待檢測的血小板緩沖液及模擬纖維蛋白原，所述激光檢測單元的光路中包括依次設置的激光光源、一號反射鏡、擴束器、一號二向色鏡、二號反射鏡、物鏡、樣品池、聚光鏡、二號二向色鏡、一號透鏡及四象限檢測器，所述照明單元的光路中包括依次設置的照明光源、二號二向色鏡、聚光鏡、樣品池、物鏡、二號反射鏡、一號二向色鏡、二號透鏡及CCD相機，檢測時，來自于物鏡的激光將選定的單個待測血小板夾持固定，通過CCD相機成像來觀察樣品池內顆粒的運動狀態。

2.根據權利要求1所述的一種用于測量人體單個血小板收縮力的裝置，其特征在于，所述的樣品池包括不銹鋼支撐板以及粘結在不銹鋼支撐板一側的雙層玻片，所述不銹鋼支撐板的中部設有通孔，所述雙層玻片包括兩片相互粘結的玻片，在兩塊玻片之間且通孔對應的區域中，放置血小板緩沖液以及模擬纖維蛋白原。

3.根據權利要求2所述的一種用于測量人體單個血小板收縮力的裝置，其特征在于，所述的模擬纖維蛋白原為核殼結構，包括中部的二氧化硅微球以及表面的纖維蛋白原，所述模擬纖維蛋白原夾持在兩塊玻片之間，且其上下側分別與兩塊玻片抵接，所述二氧化硅微球的直徑為90～120μm。

4.根據權利要求2所述的一種用于測量人體單個血小板收縮力的裝置，其特征在于，所述的血小板緩沖液采用的緩沖液包括138mM的NaCl、12mM的NaHCO₃、2.9mM的KCl、5.5mM的葡萄糖、10mM的Hepes以及0.1％(wt)的BSA。

5.根據權利要求4所述的一種用于測量人體單個血小板收縮力的裝置，其特征在于，所述的血小板緩沖液中血小板的個數為小于等于10⁶個/mL。

6.根據權利要求1所述的一種用于測量人體單個血小板收縮力的裝置，其特征在于，所述的激光為波長為800～1500nm的紅外激光。

7.一種利用如權利要求1～6任一所述裝置進行單個血小板收縮力測量方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)在不銹鋼支撐板上粘上雙面膠，然后將一塊玻片粘結在不銹鋼支撐板上，并在玻片的另一側的兩條相對側邊上粘上雙面膠，將模擬纖維蛋白原放置在該玻片表面，然后將另一塊玻片覆蓋并輕壓，使模擬纖維蛋白原與兩塊玻片抵接，然后引入血小板緩沖液，用凡士林封口，得到樣品池；

(2)將樣品池放置在光鑷樣品臺上，打開照明光源以及激光檢測單元，利用來自于物鏡的激光將選定的單個待測血小板夾持固定，通過CCD相機成像來觀察樣品池內模擬纖維蛋白原及待測血小板的運動狀態，然后通過三維平臺移動樣品池，使得模擬纖維蛋白原靠近待測血小板，并通過三維平臺記錄模擬纖維蛋白原與待測血小板之間的距離；同時通過四象限檢測器檢測激光的動量變化；

(3)步驟(2)檢測到的動量變化通過傅里葉變換和洛倫茲函數擬合之后，得功率譜密度圖，從而得到光鑷的相關光阱剛度k，根據F＝κΔx得到待測血小板與模擬纖維蛋白原之間的相互作用力，即得到單個血小板收縮力。

8.根據權利要求7所述的一種單個血小板收縮力測量方法，其特征在于，所述的功率譜密度圖中，得到拐角頻率f_c和擴散系數D^volt，然后根據公式得到光阱剛度k，其中，k_B為玻爾茲曼常數，T是溫度。