[發(fā)明專利]一種提高硒含量的富硒鐵皮石斛苗組培方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201810059426.2 | 申請日： | 2018-01-22 |
| 公開（公告）號： | CN108207631A | 公開（公告）日： | 2018-06-29 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 吳中中;吳慧斌;黃芳芳;吳騁;李軍 | 申請（專利權(quán)）人： | 浙江東來天然生物制品有限公司 |
| 主分類號： | A01H4/00 | 分類號： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 北京東方盛凡知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11562 | 代理人： | 宋平 |
| 地址： | 313000 浙*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 富硒鐵皮石斛 莖段 鐵皮石斛 組培 預(yù)處理 無菌水沖洗 放入 無菌 浸泡 分化培養(yǎng)基 氯化汞溶液 生根培養(yǎng)基 誘導(dǎo)培養(yǎng)基 增殖培養(yǎng)基 壯苗培養(yǎng)基 浸入 預(yù)處理液 增殖效率 組培技術(shù) 成苗 清洗 繁殖 培育 健康 | ||
1.一種提高硒含量的富硒鐵皮石斛苗組培方法，其特征在于，步驟如下：
1）取富硒鐵皮石斛莖段，采用無菌水清洗表面的污物，然后放入0.1%的氯化汞溶液中浸泡2-5min，再用無菌水沖洗3-4次，獲得無菌鐵皮石斛莖段；
2）將無菌鐵皮石斛莖段浸入預(yù)處理液中，浸泡處理40-50min，然后采用無菌水沖洗莖段表面2-3次，獲得預(yù)處理鐵皮石斛莖段；
3）將預(yù)處理鐵皮石斛莖段沿橫截面切成薄片，獲得組織薄片；
4）將組織薄片放入誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，在20℃、無光照的條件下進(jìn)行原球莖的萌發(fā)，獲得原球莖；
5）將原球莖接種于增殖培養(yǎng)基中，在20-25℃、光照8h/d、光照強(qiáng)度50-60lux的條件下進(jìn)行原球莖的增殖，獲得增殖原球莖；
6）將增殖原球莖接種于分化培養(yǎng)基中，在25-30℃、光照10h/d、光照強(qiáng)度100-150lux的條件下進(jìn)行誘導(dǎo)叢芽，獲得誘導(dǎo)分化的叢芽；
7）將誘導(dǎo)分化的叢芽切割分離成單芽，然后接種至生根培養(yǎng)基中，在25-30℃、光照12h/d、光照強(qiáng)度200-300lux的條件下進(jìn)行誘導(dǎo)不定根，獲得長有不定根的芽苗；
8）將芽苗接種至壯苗培養(yǎng)基中，在25-30℃、光照12h/d、光照強(qiáng)度200-300lux的條件下進(jìn)行培養(yǎng)，獲得高度為6-7cm、根長為1-2cm的成苗，即可。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高硒含量的富硒鐵皮石斛苗組培方法，其特征在于，步驟2）中，所述預(yù)處理液由以下按照重量份的原料制成：茵陳蒿8-12份、富硒茶葉15-20份、甘草4-6份、亞硒酸鈉0.1-0.2份。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的提高硒含量的富硒鐵皮石斛苗組培方法，其特征在于，步驟2）中，所述預(yù)處理液由以下按照重量份的原料制成：茵陳蒿10份、富硒茶葉17份、甘草5份、亞硒酸鈉0.15份。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的提高硒含量的富硒鐵皮石斛苗組培方法，其特征在于，步驟2）中，所述預(yù)處理液的制備方法如下：稱取茵陳蒿、富硒茶葉和甘草，分別清洗、烘干、粉碎后，合并，加入5-7倍重量的乙醇水溶液，浸泡1-2h，加熱回流提取40-50min，過濾，獲得回流提取液和回流提取殘?jiān)蚧亓魈崛堅(jiān)屑尤?-4倍重量的乙醇水溶液，浸泡2-3h，超聲波處理30-40min，過濾，獲得超聲波提取液和超聲波提取殘?jiān)瑢⒊暡ㄌ崛∫号c回流提取液合并，減壓蒸發(fā)濃縮為原體積的25%，然后加入亞硒酸鈉，攪拌溶解后，即得預(yù)處理液。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一所述的提高硒含量的富硒鐵皮石斛苗組培方法，其特征在于，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基采用1/2MS培養(yǎng)基并加入10g/L蛋白胨、0.3mg/L的亞硒酸鈉和0.4g/L的殼聚糖，混合均勻后，滅菌處理，即可。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的提高硒含量的富硒鐵皮石斛苗組培方法，其特征在于，所述增殖培養(yǎng)基采用1/2MS培養(yǎng)基并加入10g/L蔗糖、5g/L瓊脂、0.3mg/L的亞硒酸鈉、0.5g/L的殼聚糖和0.2g/L的吲哚乙酸，混合均勻后，滅菌處理，即可。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的提高硒含量的富硒鐵皮石斛苗組培方法，其特征在于，所述分化培養(yǎng)基采用MS培養(yǎng)基并加入20g/L蔗糖、10g/L瓊脂、0.5mg/L的亞硒酸鈉、0.8g/L的殼聚糖和10mg/L 6-芐氨基嘌呤，混合均勻后，滅菌處理，即可。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的提高硒含量的富硒鐵皮石斛苗組培方法，其特征在于，所述生根培養(yǎng)基采用MS培養(yǎng)基并加入20g/L香蕉汁、10g/L蛋白胨、0.4mg/L的亞硒酸鈉、0.5g/L的殼聚糖和0.2g/L萘乙酸，混合均勻后，滅菌處理，即可。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的提高硒含量的富硒鐵皮石斛苗組培方法，其特征在于，所述壯苗培養(yǎng)基采用MS培養(yǎng)基并加入20g/L土豆汁、15g/L蛋白胨、0.2mg/L的亞硒酸鈉、0.3mg/L多效唑和0.1g/L萘乙酸，混合均勻后，滅菌處理，即可。
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息，商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于浙江東來天然生物制品有限公司，未經(jīng)浙江東來天然生物制品有限公司許可，擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作，請聯(lián)系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201810059426.2/1.html，轉(zhuǎn)載請聲明來源鉆瓜專利網(wǎng)。
