[發(fā)明專利]一種檢測青稞籽粒蛋白的試劑盒和方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201810059090.X | 申請日： | 2018-01-22 |
| 公開（公告）號： | CN108220470B | 公開（公告）日： | 2021-11-16 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 王蕾;沈裕虎;王寒冬;毛成志;孔豆豆 | 申請（專利權(quán)）人： | 中國科學(xué)院西北高原生物研究所 |
| 主分類號： | C12Q1/6895 | 分類號： | C12Q1/6895 |
| 代理公司： | 成都高遠(yuǎn)知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 51222 | 代理人： | 李高峽;張娟 |
| 地址： | 810000 青*** | 國省代碼： | 青海;63 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 檢測 青稞 籽粒 蛋白 試劑盒 方法 | ||
本發(fā)明公開了一種檢測青稞低籽粒蛋白質(zhì)含量的試劑盒，它包括任選的用于檢測HvNAM1基因上第+234bp和+1433bp位點(diǎn)處變異的試劑。本發(fā)明一種檢測青稞低籽粒蛋白質(zhì)含量的方法。本發(fā)明試劑盒可以準(zhǔn)確預(yù)測青稞品種的籽粒蛋白含量，為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)有重要的指導(dǎo)作用。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及青稞的質(zhì)量檢測，具體涉及青稞籽粒蛋白的檢測試劑盒和方法。
背景技術(shù)
青稞，即六棱裸大麥(Hordeum valgare L.var.nudum Hook.f.)，屬于禾本科大麥屬 (Hordeum vulgare)作物。大麥具有豐富的營養(yǎng)價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值，六棱裸大麥主要用來食用和而二棱皮大麥則主要用于啤酒釀造業(yè)。大麥作為動物的飼料是牲畜的主要蛋白來源，大麥作為人類的食物使用量很少，青藏高原地區(qū)是世界上最大的以六棱裸大麥(青稞)為人類口糧的地區(qū)。大麥籽粒蛋白質(zhì)含量與大麥品質(zhì)之間有復(fù)雜的交互作用(Fox et al.,2003)。籽粒蛋白質(zhì)含量是決定谷物品質(zhì)的重要因素，高籽粒蛋白質(zhì)含量的大麥(12％以上)由于對品質(zhì)有較好的影響和較高的營養(yǎng)價(jià)值，通常被用作飼料和食用，而低籽粒蛋白質(zhì)含量的大麥(11.5％以下)通常被用于啤酒釀造(Distelfeld et al.,2008)或餅干等。
籽粒蛋白質(zhì)含量是衡量谷類作物品質(zhì)的重要指標(biāo)，其含量受包括基因型和環(huán)境因素在內(nèi)的多重因素的影響(JukantiFischer,2008；Smith,1990；Blanco et al.,2012；Bogard et al., 2010)。傳統(tǒng)的育種過程在籽粒蛋白質(zhì)含量品質(zhì)改良方面進(jìn)展很慢，因?yàn)樽蚜５鞍踪|(zhì)含量受復(fù)雜的基因調(diào)控的影響(Simmonds,1995)。因此，通過基因手段提前檢測青稞品種的籽粒蛋白有非常重要的實(shí)際意義。
發(fā)明內(nèi)容
為了解決上述問題，本發(fā)明提供了一種檢測青稞籽粒蛋白含量的方法。
本發(fā)明檢測青稞低籽粒蛋白質(zhì)含量的試劑盒，它包括任選的用于檢測HvNAM1基因上第+234bp和+1433bp位點(diǎn)處變異的試劑。
優(yōu)選地，它包括檢測HvNAM1基因上第+234bp為C和+1433bp為A的試劑。
優(yōu)選地，它還包括任選的用于檢測HvNAM1基因上第+54bp、+544bp、+563bp和 +1004bp位點(diǎn)處變異的試劑。
優(yōu)選地，它包括檢測HvNAM1基因上第+54bp為G、+544bp為C、+563bp為A和 +1004bp為G的試劑。
優(yōu)選地，所述試劑為測序用試劑、Snapshot試劑、限制性片段長度多態(tài)性方法用試劑或者單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析用試劑。
優(yōu)選地，所述試劑還包括擴(kuò)增HvNAM1基因全長序列并檢測第+54bp、第+234bp、+544bp、+563bp、+1004bp和+1433bp位點(diǎn)的試劑。
本發(fā)明還提供了檢測HvNAM1基因上第+234bp和+1433bp位點(diǎn)處變異的試劑在制備檢測青稞低籽粒蛋白質(zhì)含量的試劑中的用途。
本發(fā)明還提供了一種檢測青稞低籽粒蛋白質(zhì)含量的方法，其特征在于：步驟如下：
1)檢測HvNAM1基因上第+234bp和+1433bp位點(diǎn)處的堿基；
2)根據(jù)步驟1)的結(jié)果預(yù)測青稞低籽粒蛋白質(zhì)含量。
步驟1)中，還同時(shí)檢測HvNAM1基因上第+54bp、+544bp、+563bp和+1004bp位點(diǎn)的堿基。
步驟1)中，所述檢測基因的堿基的方法是測序、Snapshot、限制性片段長度多態(tài)性方法或者單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析方法。
步驟2)中，若HvNAM1基因上第+234bp為C和+1433bp為A，則青稞低籽粒蛋白質(zhì)含量低。
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