[發明專利]一種黃姑魚超氧化物歧化酶ecCu/ZnSOD基因及其應用有效
| 申請號： | 201810058725.4 | 申請日： | 2018-01-22 |
| 公開（公告）號： | CN108300724B | 公開（公告）日： | 2022-05-10 |
| 發明（設計）人： | 韓芳;宋青;王小龍;白澤清;倪棟;徐曉琴;侯人華;江小劍;童躍聰;陳劍;劉燕頔;徐暉 | 申請（專利權）人： | 廈門市產品質量監督檢驗院;集美大學 |
| 主分類號： | C12N15/53 | 分類號： | C12N15/53;C12Q1/6888;C12Q1/686 |
| 代理公司： | 廈門市首創君合專利事務所有限公司 35204 | 代理人： | 張松亭;姜謐 |
| 地址： | 361000 福建省*** | 國省代碼： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 黃姑魚 超氧化物歧化酶 eccu znsod 基因 及其 應用 | ||
1.黃姑魚超氧化物歧化酶ecCu/ZnSOD基因在亞硝態氮對黃姑魚的污染檢測中的應用，其特征在于：該黃姑魚超氧化物歧化酶ecCu/ZnSOD基因cDNA如SEQ ID NO 01所示；該cDNA以黃姑魚肝臟組織總cDNA為模板，以正向引物F1和反向引物R1為擴增引物對，通過PCR反應獲得，其中，F1包括SEQ ID NO 02所示的序列，R1包括如SEQ ID NO 03所示的序列。
2.一種亞硝態氮污染PCR檢測試劑盒，其特征在于：基于實時熒光定量PCR，以黃姑魚組織中的黃姑魚超氧化物歧化酶ecCu/ZnSOD基因為檢測對象，包括檢測引物對和內參引物對，其中，檢測引物對包括正向引物F2和反向引物R2，內參引物對包括用于檢測黃姑魚管家基因β-actin的正向引物F3和反向引物R3；
正向引物F2和反向引物R2分別如SEQ ID NO 04和05所示；
正向引物F3和反向引物R3分別如SEQ ID NO 06和07所示；
該黃姑魚超氧化物歧化酶ecCu/ZnSOD基因cDNA如SEQ ID NO 01所示。
3.如權利要求2所述的一種亞硝態氮污染PCR檢測試劑盒，其特征在于：所述黃姑魚組織為黃姑魚的肝臟組織、鰓組織和頭腎組織。
4.一種權利要求2或3所述的亞硝態氮污染PCR檢測試劑盒的使用方法，其特征在于：包括如下步驟：
（1）取不同的黃姑魚組織，提取相應的總RNA，然后反轉錄得到相應的cDNA，以此為模板，通過實時熒光定量PCR擴增所述黃姑魚超氧化物歧化酶ecCu/ZnSOD基因；
（2）采用2–ΔΔCt法對上述黃姑魚超氧化物歧化酶ecCu/ZnSOD基因的mRNA的時相差異表達進行分析。
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