[發(fā)明專利]一種選育抗菌核病甘藍(lán)型油菜育種材料的方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201810056747.7
• 申請日: 2018-01-21
• 公開（公告）號: CN108271685A
• 公開（公告）日: 2018-07-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孫曉敏;陳進(jìn);劉紅;魏煥志;何忠軍;李英;李艷明;王曉娥;薛艷;邢麗紅;張勇
• 申請（專利權(quán)）人: 孫曉敏
• 主分類號: A01H1/04
• 分類號: A01H1/04
• 代理公司: 北京科億知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11350
• 代理人: 湯東鳳

1.一種選育抗菌核病甘藍(lán)型油菜育種材料的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)菌源和接種體的制備：菌源：受侵染的油菜莖中收集的菌核，經(jīng)表面消毒后，接種于PDA培養(yǎng)基上，在23℃培養(yǎng)4～6天至長出菌絲進(jìn)行純化鑒定后，置于4℃冰箱保存?zhèn)溆茫?/p>

(2)PDA培養(yǎng)基的制備：馬鈴薯洗凈去皮，再稱取200g切成小塊，加水煮沸20～30min，能被玻璃棒戳破即可，用紗布過濾，加熱，加10g瓊脂，繼續(xù)加熱攪拌混勻，待瓊脂溶解完后，加入葡萄糖，攪拌均勻，稍冷卻后再補(bǔ)足水分至1000mL，分裝后，121℃滅菌20min左右后，冷卻后貯存?zhèn)溆茫?/p>

(3)牙簽附加麥粒的接種體制備：麥粒在水中浸泡72h，中間換水3次，選擇粗細(xì)均勻的牙簽，在PDA中煮沸10min后與麥粒一起分裝，滅菌后，分裝瓶內(nèi)放直徑為1cm左右的菌絲塊，于21℃，黑暗培養(yǎng)7天；

(4)接種。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的選育抗菌核病甘藍(lán)型油菜育種材料的方法，其特征在于：所述步驟(4)中接種的重點(diǎn)材料的接種方法為：油菜初花期時(shí)進(jìn)行菌核病人工牙簽莖稈菌絲體接種和麥粒根部接種，保證充分發(fā)??；牙簽接種是在莖稈離地面25-30cm處，將帶有菌絲體的牙簽直接插入莖稈內(nèi)，接菌后早晚噴水各一次，連續(xù)一周。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的選育抗菌核病甘藍(lán)型油菜育種材料的方法，其特征在于：所述步驟(4)中接種的種質(zhì)資源圃所有套袋材料的接種方法為：根據(jù)秦巴地區(qū)特有的氣候條件，花期選擇連陰雨天，將麥粒撒于植株根部進(jìn)行接菌。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的選育抗菌核病甘藍(lán)型油菜育種材料的方法，其特征在于：所述步驟(4)中接種的材料的抗性鑒定、選育與分析：成熟期根據(jù)周必文的抗性分級方法和國家油菜菌核病抗性分級標(biāo)準(zhǔn)，分別對相應(yīng)的牙簽附加麥粒接菌的重點(diǎn)材料和麥粒接菌的整個(gè)種植資源圃材料進(jìn)行抗性鑒定和分級。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的選育抗菌核病甘藍(lán)型油菜育種材料的方法，其特征在于：本發(fā)明是利用秦巴地區(qū)特有的花期氣候條件，通過牙簽附加麥粒接菌，進(jìn)行抗病種質(zhì)資源方法的集成創(chuàng)新，對種植資源進(jìn)行抗病性鑒定、改良和選育，成效顯著，推廣應(yīng)用價(jià)值廣泛。