[發明專利]一種利于園林植物生長的叢枝菌根真菌篩選方法

在審

• 申請號: 201810055752.6
• 申請日: 2018-01-20
• 公開（公告）號: CN110063160A
• 公開（公告）日: 2019-07-30
• 發明（設計）人: 趙海虹;胡莉;王偲博
• 申請（專利權）人: 杭州綠風生態環境建設集團有限公司
• 主分類號: A01G7/06
• 分類號: A01G7/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種利于園林植物生長的叢枝菌根真菌篩選方法，其特征在于：包括如下步驟：

（1）培養基質的配置：選用沙、土、蛭石、有機土、草炭混合物或其中幾種的混合物作為培養基質，混合物中各類基質的體積比為1:1，將培養基質填至盆缽中，填置高度為盆缽高度的4/5處，備用；

（2）催芽：挑選飽滿的園林植物種子用0.025mol/L高錳酸鉀浸泡6min，無菌水沖洗3次，置于鋪有紗布的托盤中，在28℃培養箱中催芽；

（3）接種：催芽完成后，選擇高度一致的幼苗移栽到裝好培養基的盆缽中，將叢枝菌根菌劑接種在幼苗根系附近；

（4）光照培養：接種后，將植物幼苗置于恒溫光照培養箱內培養，培養溫度25-35℃，濕度40%-80%，光照時間12-14 h/d，第1個月每天澆水，之后每3天補充一次水分，每周澆一次營養液；

（5）取生長3個月的寄主植物新鮮根樣，測量菌根侵染率；取風干后的定量根系周圍土壤，計算孢子密度；剪取植物根系，用蒸餾水洗凈并用濾紙擦干后，測定根系活力。

2.根據權利要求1所述的一種利于園林植物生長的叢枝菌根真菌篩選方法，其特征在于：所述步驟（1）的培養基質制作之前需經121℃、0.1Mpa高溫高壓蒸汽滅菌2h，烘干冷卻至室溫。

3.根據權利要求1所述的一種利于園林植物生長的叢枝菌根真菌篩選方法，其特征在于：所述步驟（1）的盆缽使用前通過噴施75%酒精溶液、紫外線照射24h進行滅菌處理。

4.根據權利要求1所述的一種利于園林植物生長的叢枝菌根真菌篩選方法，其特征在于：所述步驟（3）的接種是在塑料溫室大棚內的防蟲網中進行，溫室定期噴施酒精消毒，叢枝菌根菌劑接種劑量為每盆8-10 g，使盆內孢子數達到500-600個。

5.根據權利要求1所述的一種利于園林植物生長的叢枝菌根真菌篩選方法，其特征在于：所述步驟（3）的叢枝菌根菌劑有摩西球囊霉(G.mosseae)、地表球囊霉(Geosiphon versiforme)和根內球囊霉(G.irregularis)等。

6.根據權利要求1所述的一種利于園林植物生長的叢枝菌根真菌篩選方法，其特征在于：所述步驟（4）的營養液為稀釋10倍的標準Hoagland's營養液，每盆噴施25mL；植物補充水分為純凈水，每次每盆補充水分為300-500mL。

7.根據權利要求1所述的一種利于園林植物生長的叢枝菌根真菌篩選方法，其特征在于：所述步驟（5）的根系侵染率通過曲利苯藍染色-十字交叉法測量，孢子密度通過濕篩傾析法選出孢子，用顯微鏡觀測計數，根系活力測定用氯化三苯基四氮唑還原法。